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商品屬性
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產品名稱
pVAX1
英文名稱
pVAX1
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1351
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)解(jie): 收到質粒干粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶(rong)解(jie)質粒,室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質粒): 200μl 感受態細胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上放(fang)置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培養(yang): 毎(mei)管(guan)加(jia) 800µl LB 液體培養(yang)基,37 ℃培養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang): 將適當體積(ji)(100 µl)的復(fu)蘇細胞,涂布在相(xiang)應抗(kang)性的 LB 平板(ban)上,正(zheng)置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒置(zhi)培養(yang) 12-16h,出(chu)現菌落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單克隆菌落至相(xiang)應抗(kang)性 LB 液體培養(yang)基中,震蕩培養(yang) 12-16h,根(gen)據試驗需要提取(qu)(qu)質粒。
生長(chang)條件
LB +氨(an)芐青(qing)霉素,37℃(克隆菌株DH5a,2999bp)
安全等級
1
應用領域
科研(yan)
共(gong)享方式
公益性共享(xiang)
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