商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pYD1
英文名稱
pYD1
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1356
商品詳情
培(pei)養基(ji)
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代(dai)方法(fa)
1.溶(rong)解: 收(shou)到質粒干粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水至管底(di),溶(rong)解質粒,室溫(wen)靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(he)(吸附質粒): 200μl 感(gan)受態(tai)細(xi)胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修復培養(yang)(yang)(yang)(yang): 毎管加(jia) 800µl LB 液體培養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji),37 ℃培養(yang)(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培養(yang)(yang)(yang)(yang): 將適(shi)當體積(ji)(100 µl)的(de)復蘇細(xi)胞,涂布在相應(ying)抗(kang)性的(de) LB 平板上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)培養(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落(luo)。 7.提取(qu): 挑取(qu)單(dan)克隆菌(jun)落(luo)至相應(ying)抗(kang)性 LB 液體培養(yang)(yang)(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培養(yang)(yang)(yang)(yang) 12-16h,根據試(shi)驗(yan)需要提取(qu)質粒。
生長條件
LB +氨芐青(qing)霉素(su),37℃(克隆(long)菌(jun)株(zhu)DH5a)
存儲(chu)條(tiao)件
2-8℃
安(an)全(quan)等級
1
應用領域
科研
共享方(fang)式
公益性(xing)共享(xiang)
