商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pYD1
英文名稱
pYD1
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1356
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代(dai)方法
1.溶(rong)解: 收到質(zhi)粒(li)干粉后,請加入 20μl 無菌水至(zhi)(zhi)管底,溶(rong)解質(zhi)粒(li),室溫(wen)靜置 1min; 2.混(hun)合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上(shang)放置 30min; 3.熱(re)激導入: 42℃靜置 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)養(yang)(yang): 毎管加 800µl LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復蘇細(xi)胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗性(xing)的 LB 平(ping)板上(shang),正置平(ping)皿 30min(瓊脂面(mian)務必干燥后), 倒置培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取: 挑取單克(ke)隆(long)菌落至(zhi)(zhi)相(xiang)應(ying)抗性(xing) LB 液(ye)體(ti)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)中,震蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據試驗需要提取質(zhi)粒(li)。
生(sheng)長(chang)條件
LB +氨芐(xia)青霉素(su),37℃(克(ke)隆(long)菌株DH5a)
存儲條件(jian)
2-8℃
安全(quan)等級
1
應(ying)用(yong)領域
科(ke)研
共享方(fang)式(shi)
公益(yi)性共享(xiang)
