商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pYES2
英文名稱
pYES2
規格
質(zhi)粒(li)干粉(fen)
貨號
BJ-J1357
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)粒(li)(li)干粉后,請(qing)加入(ru) 20μl 無(wu)菌(jun)水至(zhi)管底,溶解質(zhi)粒(li)(li),室溫靜置 1min; 2.混合(he)(吸附(fu)質(zhi)粒(li)(li)): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒(li)(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰上放置 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)(fu)培(pei)養(yang): 毎管加 800µl LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji),37 ℃培(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang): 將適當體(ti)積(100 µl)的復(fu)(fu)蘇(su)細胞,涂布(bu)在相應(ying)抗(kang)性的 LB 平板(ban)上,正置平皿 30min(瓊(qiong)脂面務必干燥后), 倒置培(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑(tiao)取單克(ke)隆菌(jun)落至(zhi)相應(ying)抗(kang)性 LB 液體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),震(zhen)蕩培(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要提取質(zhi)粒(li)(li)。
生(sheng)長(chang)條件
LB +氨芐青(qing)霉(mei)素,37℃(克隆菌株DH5a,5856bp)
存儲條(tiao)件
2-8℃
安全等級
1
應用領域
科(ke)研
共享方式
公益(yi)性共享
