商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pYES2
英文名稱
pYES2
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1357
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶(rong)解(jie): 收(shou)到質(zhi)粒(li)干粉后,請加入(ru) 20μl 無菌水至(zhi)管(guan)(guan)底,溶(rong)解(jie)質(zhi)粒(li),室溫靜(jing)置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸(xi)附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻(yun),冰(bing)上(shang)放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜孔: 冰(bing)浴(yu) 2min; 5.修(xiu)復培(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)(guan)加 800µl LB 液(ye)(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選(xuan)培(pei)(pei)養(yang): 將適(shi)當體積(100 µl)的復蘇(su)細(xi)胞,涂布在相(xiang)應(ying)抗(kang)性的 LB 平(ping)板上(shang),正置(zhi)(zhi)平(ping)皿 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務(wu)必干燥后), 倒(dao)置(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出(chu)現菌落(luo)。 7.提取: 挑取單克隆(long)菌落(luo)至(zhi)相(xiang)應(ying)抗(kang)性 LB 液(ye)(ye)體培(pei)(pei)養(yang)基中(zhong),震蕩培(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試(shi)驗需要提取質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條件(jian)
LB +氨芐青霉素(su),37℃(克隆菌株DH5a,5856bp)
存(cun)儲條件
2-8℃
安全等(deng)級
1
應用領域
科研
共(gong)享方式
公(gong)益(yi)性(xing)共享
