商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pMA5
英文名稱
pMA5 plasmid
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1317
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方(fang)法
1.溶解: 收到質(zhi)粒(li)干粉后,請加(jia)入 20μl 無菌(jun)水(shui)至管底,溶解質(zhi)粒(li),室溫靜置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附(fu)質(zhi)粒(li)): 200μl 感受態細胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放(fang)置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導(dao)入: 42℃靜置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養: 毎管加(jia) 800µl LB 液體培(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適當體積(100 µl)的(de)復(fu)蘇細胞(bao),涂布(bu)在相應抗性的(de) LB 平板上,正置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提(ti)取: 挑取單(dan)克隆菌(jun)落至相應抗性 LB 液體培(pei)養基(ji)中,震蕩培(pei)養 12-16h,根據(ju)試驗需要提(ti)取質(zhi)粒(li)。
生長(chang)條件
LB+氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等(deng)級(ji)
1
應用(yong)領域
質粒載體
共享方式
公益性共享
