商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pUC118
英文名稱
pUC118 plasmid
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1343
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶解(jie): 收到質(zhi)粒干粉后(hou),請加入 20μl 無菌水至管(guan)底,溶解(jie)質(zhi)粒,室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)粒): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang)(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液(ye)體培(pei)養(yang)(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang)(yang): 將適當體積(100 µl)的復(fu)蘇細(xi)胞,涂(tu)布在相應抗性(xing)(xing)的 LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊脂(zhi)面務必干燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,出現菌落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單克隆菌落至相應抗性(xing)(xing) LB 液(ye)體培(pei)養(yang)(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang)(yang)(yang) 12-16h,根(gen)據試(shi)驗需(xu)要提取(qu)(qu)質(zhi)粒。
生長條件
LB+氨芐青霉素,37℃(克隆(long)菌株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域(yu)
質粒(li)載體
共(gong)享方式(shi)
公益性共享
