商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pUC119
英文名稱
pUC119 plasmid
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1344
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)干(gan)粉后(hou),請加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶解質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li),室(shi)溫靜(jing)置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)): 200μl 感受態(tai)細(xi)胞(bao) + 質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜(jing)置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮(suo)膜(mo)孔(kong): 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800µl LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji),37 ℃培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang): 將適當體(ti)積(ji)(100 µl)的復蘇細(xi)胞(bao),涂布在相(xiang)應抗性(xing)的 LB 平板上(shang),正(zheng)置(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂(zhi)面務必干(gan)燥后(hou)), 倒置(zhi)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出(chu)現菌(jun)落。 7.提(ti)取: 挑取單克(ke)隆菌(jun)落至(zhi)相(xiang)應抗性(xing) LB 液體(ti)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)中,震蕩(dang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗(yan)需要提(ti)取質(zhi)(zhi)(zhi)粒(li)。
生(sheng)長(chang)條件
LB+氨芐(xia)青(qing)霉(mei)素,37℃(克隆菌株DH5α)
存儲(chu)條件
2-8℃
安全等級
1
應用領域(yu)
質(zhi)粒載體
共享方式
公益性共享
