商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pUC18
英文名稱
pUC18 plasmid
規格
質粒(li)干粉
貨號
BJ-J1345
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法(fa)
1.溶解: 收(shou)到(dao)質(zhi)粒(li)干粉后(hou),請加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底(di),溶解質(zhi)粒(li),室(shi)溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)粒(li)): 200μl 感受(shou)態(tai)細(xi)胞(bao) + 質(zhi)粒(li) DNA 5~10μl 混勻,冰上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復培養: 毎(mei)管(guan)加 800μl LB 液(ye)體培養基,37 ℃培養 1h 150 r/min; 6.篩選培養: 將適當(dang)體積(100 μl)的(de)復蘇細(xi)胞(bao),涂布在(zai)相(xiang)應抗性(xing)(xing)的(de) LB 平板(ban)上,正置(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒置(zhi)培養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克隆菌(jun)落至相(xiang)應抗性(xing)(xing) LB 液(ye)體培養基中,震蕩培養 12-16h,根據試驗(yan)需(xu)要提取(qu)質(zhi)粒(li)。
生(sheng)長條件
LB+氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全等(deng)級
1
應用領域(yu)
質粒載體
共享(xiang)方式
公益性共享
