商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pUC18
英文名稱
pUC18 plasmid
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1345
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法(fa)
1.溶(rong)解: 收(shou)到質粒(li)干粉后,請加入(ru) 20μl 無菌(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶(rong)解質粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混合(吸附質粒(li)): 200μl 感(gan)受態細(xi)(xi)胞 + 質粒(li) DNA 5~10μl 混勻(yun),冰(bing)上放置(zhi) 30min; 3.熱激導入(ru): 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜(mo)孔(kong): 冰(bing)浴 2min; 5.修復(fu)培(pei)養(yang)(yang): 毎管(guan)加 800μl LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基,37 ℃培(pei)養(yang)(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養(yang)(yang): 將適(shi)當體積(ji)(100 μl)的(de)復(fu)蘇細(xi)(xi)胞,涂布在(zai)相應(ying)抗(kang)性的(de) LB 平板上,正置(zhi)平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂面務(wu)必干燥后), 倒(dao)置(zhi)培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單(dan)克隆(long)菌(jun)落至(zhi)相應(ying)抗(kang)性 LB 液體培(pei)養(yang)(yang)基中,震蕩培(pei)養(yang)(yang) 12-16h,根據試驗需要提取(qu)(qu)質粒(li)。
生長(chang)條(tiao)件
LB+氨芐(xia)青霉素,37℃(克隆菌株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
1
應用領域
質粒載體
共享方式(shi)
公(gong)益(yi)性共享
