商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pHT304
英文名稱
pHT304
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1303
商品詳情
培(pei)養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳(chuan)代方法
1.溶解: 收到質粒干粉后(hou),請加入 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底,溶解質粒,室溫靜置(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(he)(吸附質粒): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質粒 DNA 5~10µl 混勻,冰(bing)上放置(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi)(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修復培(pei)養: 毎管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將適當(dang)體積(100 µl)的復蘇細(xi)胞,涂布在相應(ying)抗性的 LB 平板上,正(zheng)置(zhi)(zhi)平皿(min) 30min(瓊脂面務(wu)必(bi)干燥后(hou)), 倒置(zhi)(zhi)培(pei)養 12-16h,出(chu)現(xian)菌(jun)落(luo)。 7.提(ti)取: 挑取單克(ke)隆菌(jun)落(luo)至相應(ying)抗性 LB 液體培(pei)養基(ji)中,震蕩培(pei)養 12-16h,根據試驗需要提(ti)取質粒。
生(sheng)長條件(jian)
LB +氨(an)芐青霉(mei)素,37℃(克隆菌(jun)株(zhu)DH5α,6530bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域(yu)
科研
共(gong)享方(fang)式
公益性(xing)共享
