商品描述:
商品屬性
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產品名稱
pHT304
英文名稱
pHT304
規格
質(zhi)粒干粉
貨號
BJ-J1303
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收到質粒(li)干粉后,請(qing)加(jia)(jia)入 20μl 無菌(jun)水(shui)至管底,溶解質粒(li),室溫靜置(zhi) 1min; 2.混(hun)合(吸附質粒(li)): 200μl 感受態(tai)細(xi)胞(bao) + 質粒(li) DNA 5~10µl 混(hun)勻(yun),冰上(shang)放置(zhi) 30min; 3.熱激導入: 42℃靜置(zhi) 90s; 4.收縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修(xiu)復培(pei)養: 毎(mei)管加(jia)(jia) 800µl LB 液(ye)體培(pei)養基(ji),37 ℃培(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)養: 將(jiang)適當體積(100 µl)的復蘇(su)細(xi)胞(bao),涂(tu)布在相應抗(kang)性的 LB 平板(ban)上(shang),正置(zhi)平皿 30min(瓊(qiong)脂面務必干燥(zao)后), 倒置(zhi)培(pei)養 12-16h,出現(xian)菌(jun)落(luo)。 7.提(ti)取(qu): 挑取(qu)單克隆菌(jun)落(luo)至相應抗(kang)性 LB 液(ye)體培(pei)養基(ji)中,震(zhen)蕩培(pei)養 12-16h,根據試驗需(xu)要提(ti)取(qu)質粒(li)。
生長條件(jian)
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌株DH5α,6530bp)
存儲(chu)條件(jian)
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科(ke)研
共享方式(shi)
公益性(xing)共享
