商品描述:
商品屬性
商品描述:
商品屬性
商品屬性:
產品名稱
pHY300PLK
英文名稱
pHY300PLK
規格
質粒干粉
貨號
BJ-J1305
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解(jie): 收(shou)到質(zhi)粒干粉后(hou),請加入 20μl 無菌(jun)水至管(guan)底(di),溶解(jie)質(zhi)粒,室(shi)溫(wen)靜置 1min; 2.混(hun)合(吸附質(zhi)粒): 200μl 感受態細胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻(yun),冰(bing)(bing)上(shang)放置 30min; 3.熱(re)激導入: 42℃靜置 90s; 4.收(shou)縮膜孔(kong): 冰(bing)(bing)浴(yu) 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養: 毎(mei)管(guan)加 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)養: 將適(shi)當體積(100 µl)的復蘇細胞,涂布在(zai)相應抗性的 LB 平板(ban)上(shang),正置平皿 30min(瓊(qiong)脂面務必干燥后(hou)), 倒置培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,出現菌(jun)落。 7.提取: 挑取單克隆菌(jun)落至相應抗性 LB 液體培(pei)(pei)(pei)養基中(zhong),震蕩培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,根(gen)據試驗需要提取質(zhi)粒。
生長(chang)條(tiao)件
LB +氨芐青霉素,37℃(克隆菌(jun)株DH5α)
存儲條件
2-8℃
安(an)全等級
0
應(ying)用(yong)領(ling)域(yu)
科研
共(gong)享方(fang)式
公益性共(gong)享
