商品描述:
商品屬性
商品描述:
商品屬性
商品屬性:
產品名稱
大腸綠色熒光表達質粒
英文名稱
pET28a-EGFP
規格
質(zhi)粒(li)干(gan)粉
貨號
BJ-J1693
商品詳情
培養基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方(fang)法
1.溶解: 收到質(zhi)粒干粉后(hou),請加(jia)入(ru) 20μl 無菌(jun)(jun)水至(zhi)管(guan)底,溶解質(zhi)粒,室(shi)溫(wen)靜(jing)置 1min; 2.混(hun)合(he)(吸(xi)附質(zhi)粒): 200μl 感(gan)受(shou)態(tai)細(xi)胞 + 質(zhi)粒 DNA 5~10µl 混(hun)勻,冰(bing)上放置 30min; 3.熱(re)激導入(ru): 42℃靜(jing)置 90s; 4.收縮膜孔: 冰(bing)浴 2min; 5.修(xiu)復(fu)(fu)培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang): 毎管(guan)加(jia) 800µl LB 液體培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 1h 150 r/min; 6.篩選培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang): 將(jiang)適當體積(100 µl)的(de)復(fu)(fu)蘇細(xi)胞,涂布在相應抗性的(de) LB 平板上,正置平皿(min) 30min(瓊(qiong)脂面務必(bi)干燥后(hou)), 倒置培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,出現菌(jun)(jun)落。 7.提取(qu): 挑(tiao)取(qu)單克隆菌(jun)(jun)落至(zhi)相應抗性 LB 液體培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基中,震(zhen)蕩培(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang) 12-16h,根據試驗需要提取(qu)質(zhi)粒。
生長條件
LB +卡(ka)那霉素,37℃(克(ke)隆(long)菌株DH5α,6050bp)
存儲條件
2-8℃
安全(quan)等級
0
應用領域
科研
共(gong)享方式(shi)
公益性共享
