商品描述:
商品屬性
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產品名稱
大腸綠色熒光表達質粒
英文名稱
pET28a-EGFP
規格
質粒干(gan)粉
貨號
BJ-J1693
商品詳情
培養(yang)基
酵母膏:5.0,蛋白胨:10.0,NaCl:10.0,pH:7.0(25℃)
傳代方法
1.溶解: 收(shou)到質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)干粉后(hou),請加(jia)入 20μl 無菌水(shui)至(zhi)管底,溶解質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li),室(shi)溫(wen)靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi) 1min; 2.混合(吸附質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)): 200μl 感受態細(xi)胞 + 質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li) DNA 5~10µl 混勻,冰上放置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi) 30min; 3.熱激(ji)導入: 42℃靜(jing)置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi) 90s; 4.收(shou)縮膜孔: 冰浴 2min; 5.修復培(pei)(pei)(pei)養: 毎管加(jia) 800µl LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)(pei)養基,37 ℃培(pei)(pei)(pei)養 1h 150 r/min; 6.篩(shai)選培(pei)(pei)(pei)養: 將適當體(ti)積(100 µl)的(de)復蘇細(xi)胞,涂布在(zai)相(xiang)應抗性(xing)的(de) LB 平板上,正置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)平皿 30min(瓊脂面務必干燥后(hou)), 倒(dao)置(zhi)(zhi)(zhi)(zhi)培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,出現菌落(luo)。 7.提(ti)(ti)取(qu)(qu): 挑取(qu)(qu)單(dan)克隆菌落(luo)至(zhi)相(xiang)應抗性(xing) LB 液(ye)體(ti)培(pei)(pei)(pei)養基中,震蕩培(pei)(pei)(pei)養 12-16h,根據試(shi)驗(yan)需要提(ti)(ti)取(qu)(qu)質(zhi)(zhi)粒(li)(li)(li)。
生長條件
LB +卡那(nei)霉素,37℃(克隆菌株DH5α,6050bp)
存儲條件
2-8℃
安全等級
0
應用領域
科研
共(gong)享方式
公(gong)益性共享
