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RNAlong RNA 長期保存液





RNAlong RNA 長期保存液

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  • 商品品牌:邦景/BHBT
  • 上架時間:2024-06-27
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RNAlong RNA 長期保存液
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RNAlong RNA 長期保存液

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BJ-PJ6333

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保存條件:4℃。
產品介紹:
RNA性質不(bu)穩定,極易降解(jie)。溶解(jie)于無RNase的TE 或(huo)水(shui)中(zhong)的純化RNA,即便(bian)是儲存于-20 ºC也難免降解(jie)。為(wei)解(jie)決這一問題,可(ke)以將RNA沉淀或(huo)RNA溶液(ye)溶解(jie)于RNA 長期(qi)保(bao)存液(ye)中(zhong),允許RNA 4ºC保(bao)存或(huo)-20ºC至少(shao)保(bao)存1年而免于降解(jie)。RNA長期(qi)保(bao)存液(ye)是RNA樣品(pin)運(yun)輸和(he)中(zhong)長期(qi)保(bao)存的最佳選擇(ze)。需要時(shi)可(ke)用常規乙醇法沉淀回收RNA,或(huo)直接吸取儲存于RNA 溶解(jie)保(bao)護液(ye)中(zhong)的高濃度RNA(可(ke)達4 mg/ml)進(jin)行(xing)RNA 電泳(yong)、Northern Blot。
注意事項:
1. RNA 長期保存液可能(neng)抑制逆轉錄酶(mei)活性(xing),做 RT-PCR 反應(ying)前(qian)應(ying)該(gai)用乙醇沉淀 RNA。
2. 在 RNA 長期(qi)保存(cun)(cun)液(ye)中的 RNA 的終(zhong)濃(nong)度(du)不應該超過 4μg /μl。用 RNA 長期(qi)保存(cun)(cun)液(ye)溶(rong)解(jie) RNA 沉淀(dian):
1. 對固體(ti) RNA 沉(chen)淀(dian),每 0.4-4μg RNA 沉(chen)淀(dian)加(jia)入 1μl RNA 長期(qi)保存(cun)液(ye)(ye),反復吹(chui)(chui)打(da)混勻(yun)或者室溫振蕩 15-30 min 溶解沉(chen)淀(dian)。干燥的 RNA 沉(chen)淀(dian)難以溶解,可反復吹(chui)(chui)打(da)混勻(yun)后 50ºC 加(jia)熱(re) 10-15 min。最好先用小體(ti)積無 RNase 的TE 或水溶解 RNA 沉(chen)淀(dian),然后按液(ye)(ye)態 RNA 操作。
2. 對液(ye)態 RNA 溶液(ye),每 0.4-4μg RNA 溶液(ye)加入 1μl RNA 長期(qi)保存(cun)液(ye),混勻(yun)。注意混合(he)液(ye)中 RNA 長期(qi)保存(cun)液(ye)的體積百分比不低(di)于 80%。
3. 測定 OD 值(zhi)。注(zhu)意(yi)加入相應量(liang)的 RNA 長(chang)期保存液(ye)做空白。
4. 將溶(rong)解的 RNA 樣品儲存于-20 ºC 或(huo)者-70 ºC。從(cong) RNA 長期保存液中沉淀 RNA:
1. 估(gu)計 RNA 溶液(ye)終(zhong)體積。加(jia)入(ru) 4 倍(bei)體積的無水(shui)乙醇,混勻(yun)。如(ru)(ru)果(guo)溶液(ye)體積過小,可加(jia)入(ru) RNase free water 稀釋 RNA 溶液(ye),如(ru)(ru)果(guo)溶液(ye)中 RNA 含量低于(yu) 0.25μg /μl,可加(jia)入(ru) 5M NaCl(RNase free) 至終(zhong)濃度 0.2M,混勻(yun)后再加(jia)入(ru) 4 倍(bei)體積乙醇。
2. 室溫放(fang)置 5 min。
3. 12,000rpm 離心 5 min,棄上清,風干,溶解。
4. 重新沉(chen)淀(dian)的 RNA 溶解后(hou)可(ke)用于 RT-PCR 反應。也可(ke)用于任何(he)其他實(shi)驗。直接使用 RNA 長(chang)期保存液(ye)中(zhong)(zhong)的 RNA:直接吸取 RNA 長(chang)期保存液(ye)中(zhong)(zhong)的 RNA,進(jin)行(xing)普通或甲醛變性(xing)電泳(yong)和 Northern Blot。進(jin)行(xing)甲醛變性(xing)電泳(yong)時(shi),最后(hou)上樣的樣品中(zhong)(zhong)的 RNA 長(chang)期保存液(ye)的濃度(du)可(ke)高達 50%。
附:甲(jia)醛變性電泳樣(yang)品(pin)準備: 臨用前,混合水(87μl),甲(jia)醛(81μl),50%甘(gan)油/含(han) 0.25 mg/ml 溴芬蘭(48μl ) 和20X MOPS (24μl). 將(jiang)上述混合液和 RNA 長期保(bao)存液中的 RNA 樣(yang)品(pin)等體積混合,55 ºC 溫育 10 min,按照標準
的(de)甲醛變性電泳(yong)過程上樣。

 

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