NHS活化磁珠

商品屬性(xing)：

產品名稱	規格(ge)	貨號
NHS活化磁珠	1ml（30mg/ml）	BJ-PJ6381

商品(pin)介(jie)紹：

產品介紹： NHS-Activated Magnetic Beads 是均勻的(de)(de)，表面(mian)覆蓋(gai)有(you)(you)高密度(du)NHS（N-羥(qian)基(ji)琥珀 酰亞胺） 官能團(tuan)的(de)(de)磁珠。磁珠通過形成(cheng)穩定的(de)(de)酰胺鍵方式(shi)，快速、高效(xiao)的(de)(de)共價結(jie)(jie)合任何含有(you)(you)伯胺的(de)(de)配(pei) 體(ti)(圖(tu) 1）。本款磁珠可(ke)以(yi)在偶聯條件下快速完(wan)成(cheng)反應（室(shi)溫 pH 6.5-9 下 15-30 分(fen) 鐘，4℃ 下 4 小(xiao)時），且不(bu)需(xu)要危險化(hua)(hua)學品(pin)。 NHS-activated Magnetic Beads 最(zui)適(shi)于(yu)結(jie)(jie)合大分(fen)子(zi)(zi)蛋白。 Long-arm NHS-activated Magnetic Beads 被推薦用于(yu)結(jie)(jie)合小(xiao)肽分(fen)子(zi)(zi)， 因為其長臂（21-原子(zi)(zi)） 的(de)(de)親水連(lian)接基(ji)團(tuan)可(ke)以(yi)減少位阻(zu)現象。 NHS-activated Magnetic Beads 可(ke)以(yi)完(wan)美地作為親和(he)樹脂進行親和(he)純化(hua)(hua)，將分(fen)子(zi)(zi)、 細(xi)胞和(he) 部分(fen)細(xi)胞提取物進行提煉(lian)純化(hua)(hua)。在與配(pei)體(ti)結(jie)(jie)合后(hou)(hou)，將磁珠添加到(dao)含有(you)(you)目(mu)標(biao)分(fen)子(zi)(zi)的(de)(de)樣品(pin)中，然 后(hou)(hou)混合、孵育(yu)、洗滌(di)和(he)洗脫(tuo)目(mu)標(biao)分(fen)子(zi)(zi)（圖(tu)2）。

產品特點及優勢：

·預活化即用型磁珠
·便于使用
·在pH7.4，4℃-25℃條件下可以快速偶聯
·穩定的共價鍵，低水平的配體泄漏
·可重復使用的免疫親和基質
·極低的非特異性結合率
·用途：用于純化抗體，蛋白質/肽，DNA / RNA;細胞篩選、免疫沉淀
操作步驟

提示：
強烈建議在實驗過程中進行滴定優化，以確定每個實驗中應用的磁珠數量。該協議可以相應地放大和縮小。避免使用含有 tris 或其他含有伯胺類試劑的緩沖液，因為它們與預期的偶聯反應競爭。
1.將適量的珠子轉(zhuan)移到離(li)(li)心管(guan)中(zhong)。將管(guan)放在(zai)磁(ci)力分離(li)(li)器上 1-3 分鐘。當磁(ci)珠完全(quan)沉淀(dian)時(shi)， 去(qu)除上清液。 

2.取下試管(guan)，加入 5 倍磁(ci)(ci)珠(zhu)(zhu)(zhu)溶(rong)液(ye)體積(ji)的 PBS 緩沖液(ye)，通過震蕩重新(xin)懸浮磁(ci)(ci)珠(zhu)(zhu)(zhu)，渦旋(xuan) 30 秒(miao)。將試管(guan)至于室溫環境 1-3 分鐘，再將管(guan)放在磁(ci)(ci)力(li)分離器上 1-3 分鐘。當(dang)磁(ci)(ci)珠(zhu)(zhu)(zhu)完(wan)全(quan)沉淀 時，去除上清液(ye)。 

3.重復步驟 2 兩次。 

4.向含(han)有(you)目(mu)標(biao)蛋(dan)白(bai)質的(de)粗樣品中添(tian)加洗滌過的(de)磁珠，并在室(shi)溫或所需溫度下(xia)溫浴(yu) 1-2 小時(shi) （溫度越低(di)，培(pei)(pei)養時(shi)間(jian)越長）。提示(shi)：強烈(lie)建議(yi)進行滴定(ding)實驗以(yi)優化培(pei)(pei)養時(shi)間(jian)。因為孵(fu)化 的(de)時(shi)間(jian)太長可能會導致很高的(de)背(bei)景。 

5.用 5 倍磁珠體積的 PBS 緩(huan)沖液(ye)或 1M NaCl 徹底清洗(xi)磁珠，直到 280nm 處洗(xi)脫(tuo)液(ye)的吸 光度接近背景水平(ping)（OD 280<0.05）。提示：添(tian)加(jia)(jia)更高(gao)(gao)濃度的鹽、非(fei)離(li)子洗(xi)滌劑(ji)(ji)和還原劑(ji)(ji)也 可能會降低(di)非(fei)特(te)異性(xing)背景。例如(ru)，向洗(xi)滌緩(huan)沖液(ye)中添(tian)加(jia)(jia) NaCl（濃度為 1-1.5 M）、0.1-0.5% 的非(fei)離(li)子洗(xi)滌劑(ji)(ji)，如(ru) TritonX-100 或 Tween-20，以(yi)及(ji)還原劑(ji)(ji)，如(ru) DTT 或 TCEP（我們通(tong) 常使(shi)用 3mM）。 6.通(tong)過適當的方法，如(ru)低(di) pH（2-4）、高(gao)(gao) pH（10-12）、高(gao)(gao)鹽、高(gao)(gao)溫、親和洗(xi)脫(tuo)或 SDS-PAGE 上(shang)樣(yang)緩(huan)沖液(ye)中煮(zhu)沸，洗(xi)脫(tuo)目(mu)標(biao)蛋白。