pBM28 Toposmart Cloning Kit（gateway系統入門 TOPO克隆載體）

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產品名稱	規格	貨號
pBM28 Toposmart Cloning Kit（gateway系統入門 TOPO克隆載體）	20 次 ×3	BJ-PJ6528

商品介(jie)紹：

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產品介紹：
利(li)用痘苗病毒(du)的拓撲異構(gou)酶I(Topoisomerase I)的切(qie)割再連接的特(te)點將PCR產物定(ding)向克
隆(long)到線性化的pBM28載體中。適用(yong)于(yu)克隆(long)由Pfu、sPfu、KOD、Xerox、Phusion和Q5 等高
保真DNA聚合酶擴增(zeng)的(de)平(ping)末(mo)端PCR產物。pBM28 載體類似于invitrogen公司(si)的(de)pENTR/DTOPO入(ru)門(men)載體， 具有attL1 和attL2，為gateway系統中的(de)入(ru)門(men)載體。引物M13F(-21)和
M13R可用(yong)于菌落PCR和測序鑒定。
產品特點：
（1）連(lian)接反(fan)應僅需 5 分鐘。
（2）只適(shi)合平末端 PCR 產物的(de)快速、高效、定向克隆。
（3）載(zai)體采用了新的(de)制備(bei)工(gong)藝，零背景(jing)，無需藍白斑(ban)篩選。
（4）與(yu)pBM27載(zai)體(ti)相比(bi)，pBM28載(zai)體(ti)無標簽(qian)序列。
（5）載體為壯觀霉(mei)素(su)抗性。
注意事項：
（1）引物(wu)(wu)(wu)要求：PCR 引物(wu)(wu)(wu)5’端不能(neng)進行磷(lin)酸化修飾，普通商業(ye)化引物(wu)(wu)(wu)即可。上(shang)游引物(wu)(wu)(wu)的5’ 端添加CACC 四個堿基（CACC 為真核表達所必(bi)需的 Kozak 序列）。
（2）DNA 聚(ju)合酶：選用Pfu、sPfu、Phusion、Q5、KOD 和Xerox 等(deng)高保真DNA 聚(ju)合酶用
于PCR 擴增(zeng)。
（3）連接時間：5-15 分鐘，一般為 15 分鐘。
（4）連接溫度：室溫 (22℃-37℃)，可使用(yong)PCR儀控溫。最佳反(fan)應溫度為(wei)25℃。若片(pian)段有(you)
高GC等復雜結構，可在37℃反(fan)應。
（5）產物要(yao)求：為保證PCR產物完整(zheng)，建(jian)議(yi)72℃后延伸5-10分(fen)鐘。