pBM30 Toposmart Cloning Kit（TOPO克隆載體 原核表達）

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pBM30 Toposmart Cloning Kit（TOPO克隆載體 原核表達）	20 次	BJ-PJ6529

商品介紹：

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產品介紹：
利用(yong)痘苗病毒的(de)拓撲異構酶(mei)I(Topoisomerase I)的(de)切割再連接的(de)特點將PCR產物定向(xiang)克隆(long)到線(xian)性化的(de)pBM30原核表達載體中。適用(yong)于克隆(long)由Pfu、KOD、Xerox、Phusion和(he)Q5等高保真DNA聚合酶(mei)擴增(zeng)的(de)平末端PCR產物。引(yin)物T7和(he)T7t可用(yong)于菌(jun)落(luo)PCR和(he)測(ce)序鑒(jian)定。
產品特點：
（1） 連(lian)接(jie)反應僅需 5 分鐘
（2） 只適合平末端PCR 產物的快速、高效、定向(xiang)克隆。
（3） 載體采用(yong)了新的制備工藝，零背景，無需藍白斑篩選。
（4） 具有T7 啟動子，類似(si)于 pET30 載(zai)體，具備(bei)原核表達所需的所有調控元件。適用于外源(yuan)基因在(zai)大(da)腸桿菌中的高水平表達。
（5） 帶 His.tag 和 S.tag 兩種(zhong)純化(hua)標簽(qian)。
（6） 具有(you)凝血酶(mei)和腸激酶(mei)兩(liang)種蛋白(bai)酶(mei)酶(mei)切識(shi)別序列。
（7） 載體具有卡那(nei)霉素(su)抗(kang)性。
注意事項：
（1） 引(yin)物(wu)要求：PCR 引(yin)物(wu) 5’端(duan)不能(neng)進行磷(lin)酸化(hua)(hua)修飾，普通商業化(hua)(hua)引(yin)物(wu)即可。上游引(yin)物(wu)的 5’端(duan)添加 CACC 四個堿(jian)基。如果表達蛋(dan)白需 C 端(duan)帶 6His 標(biao)簽(qian)，下游引(yin)物(wu)則需要去掉基因本身(shen)的終止密碼(ma)子（3 個堿(jian)基）。目(mu)的蛋(dan)白的翻譯終止由 6His 標(biao)簽(qian)的終止密碼(ma)子TGA 來(lai)實現。
（2） DNA 聚(ju)合(he)酶：選用 Pfu、sPfu、Phusion、Q5、KOD 和 Xerox 等高(gao)保真 DNA 聚(ju)合(he)酶用于(yu) PCR 擴(kuo)增。
（3） 連接時(shi)間：5-15 分鐘(zhong)，一(yi)般為 15 分鐘(zhong)。