pBM28 Toposmart 克隆試劑盒

商品屬性：

產品名稱(cheng)	規格(ge)	貨(huo)號
pBM28 Toposmart 克隆試劑盒	20 次(ci)	BJ-PJ6533

商品介紹(shao)：

保存條件：-20℃保存(cun)。
產品介紹：
利用痘(dou)苗病毒的(de)(de)(de)拓(tuo)撲異構酶(mei)I(Topoisomerase I)的(de)(de)(de)切割(ge)再連接的(de)(de)(de)特點將PCR產物定向克(ke)隆(long)到線(xian)性化的(de)(de)(de)pBM28載體(ti)中(zhong)。適用于克(ke)隆(long)由Pfu、sPfu、KOD、Xerox、Phusion和(he)Q5 等高保(bao)真(zhen)DNA聚合(he)酶(mei)擴(kuo)增(zeng)的(de)(de)(de)平(ping)末端PCR產物。pBM28 載體(ti)類(lei)似于公司的(de)(de)(de)pENTR/D-TOPO入門載體(ti)， 具有(you)attL1 和(he)attL2，為gateway系統中(zhong)的(de)(de)(de)入門載體(ti)。引(yin)物M13F(-21)和(he)M13R可用于菌落(luo)PCR和(he)測序鑒定。
產品特點：
（1）連接反(fan)應僅需 5 分鐘。
（2）只(zhi)適合(he)平末(mo)端 PCR 產(chan)物的快速、高效(xiao)、定向克隆(long)。
（3）載體采(cai)用了(le)新的(de)制備工藝(yi)，零背景，無需藍白斑篩選。
（4）與pBM27載體相比，pBM28載體無標簽序列。
（5）載體為壯觀(guan)霉(mei)素抗性。
注意事項：
（1）引物(wu)要求：PCR 引物(wu)5’端不能(neng)進行磷酸化修飾，普通商業化引物(wu)即可。上游引物(wu)的5’ 端添(tian)加CACC 四個(ge)堿基（CACC 為真核表(biao)達所必需的Kozak 序列(lie)）。
（2）DNA 聚合(he)酶(mei)(mei)：選用(yong)Pfu、sPfu、Phusion、Q5、KOD 和Xerox 等(deng)高保真DNA 聚合(he)酶(mei)(mei)用(yong)于PCR 擴增。
（3）連接時間：5-15 分鐘，一(yi)般(ban)為(wei) 15 分鐘。
（4）連(lian)接(jie)溫度：室溫 (22℃-37℃)，可(ke)(ke)使(shi)用PCR儀控(kong)溫。最佳反應(ying)溫度為25℃。若片段有高GC等復雜結構(gou)，可(ke)(ke)在37℃反應(ying)。
（5）產(chan)物要求：為(wei)保證PCR產(chan)物完整，建議(yi)72℃后延伸5-10分鐘。連接前使用瓊(qiong)脂糖凝