pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit（線性化質粒）

商品屬(shu)性：

產品名稱	規格	貨(huo)號
pcDNA3.1(+) Seamless Cloning Kit（線性化質粒）	20 μl	BJ-PJ6545

商品介(jie)紹：

產品介紹：
pcDNA3.1(+)載體(ti)(ti)(ti)為哺(bu)乳動物細胞表達載體(ti)(ti)(ti)，具有人(ren)巨細胞病毒(CMV)啟動子，在哺(bu)乳動物細胞中高(gao)水平表達；新霉素抗性(xing)(xing)基(ji)因，用于選擇穩(wen)定細胞系。本產品提供pcDNA3.1(+)經EcoRⅠ酶切后的線性(xing)(xing)化載體(ti)(ti)(ti)，可用無縫克隆技術將(jiang)單個(ge)或多個(ge)DNA片段組(zu)裝(zhuang)到載體(ti)(ti)(ti)上。
無縫(feng)克隆技(ji)術(shu)可在重組(zu)酶的作用下，只需(xu)一步反應，便可將(jiang)片段(duan)克隆到任何載體中的任意(yi)位置(zhi)，得到重組(zu)質粒(li)。無縫(feng)克隆技(ji)術(shu)作為一種非常強大的克隆技(ji)術(shu)，具有快速、簡便、高效、多(duo)片段(duan)組(zu)裝和(he)定(ding)向克隆等特(te)點，用于單個 DNA 片段(duan)的克隆，多(duo)個 DNA 片段(duan)組(zu)裝克隆以及多(duo)位點突變構建(jian)等實驗目的。
產品特點：
1. pcDNA3.1(+)具有(you)人(ren)巨細胞病毒(du)(CMV)啟動子，在哺乳動物細胞中高水(shui)平表達。
2. pcDNA3.1(+)具(ju)有新霉素抗性基因，用于選擇(ze)穩定細胞系。
3. pcDNA3.1(+)經EcoRⅠ酶切后的線(xian)性化載體，省(sheng)時省(sheng)力(li)。
4. 無縫克(ke)隆技術只需要簡(jian)單的 PCR 擴增(zeng)就(jiu)可以(yi)制備片段(duan)DNA。
5. 可以(yi)克隆(long)長片(pian)段和多片(pian)段DNA。
操作步驟：
1. pcDNA3.1(+)線性化載體(ti)使用方法：
(1) pcDNA3.1(+)線性化載體當(dang)做克隆載體使用(yong)，可以(yi)在擴增PCR產物的
上游(you)引物 5’端添加序(xu)列：TAGGGAGACCCAAGCTGGCTAGCgccacc（gccacc為Kozak序(xu)列）
下游引(yin)物 5’端添加序列：CACTGTGCTGGATATCTGCAGAATTC
通(tong)過無縫克隆連接(jie)到pcDNA3.1(+)中。
(2) 測序引物
pcDNA3.1-F:CTAGAGAACCCACTGCTTAC
pcDNA3.1-R(BGH-R):TAGAAGGCACAGTCGAGG
(3) pcDNA3.1(+)線性化(hua)載(zai)體為 EcoRⅠ酶切后的線性化(hua)載(zai)體，圖(tu)譜及多克(ke)隆位點見下圖(tu)。