pET-22b(+) Seamless Cloning Kit（線性化質粒）

商品屬性：

產(chan)品名稱	規(gui)格	貨號
pET-22b(+) Seamless Cloning Kit（線性化質粒）	20 μl	BJ-PJ6546

商品介(jie)紹：

保存條件：-20℃保(bao)存(cun)
產品介紹：
pET-22b(+)載(zai)體(ti)為高水平的原核表達(da)載(zai)體(ti)，在N端(duan)含有PelB信號肽(tai)序(xu)列，能夠將表達(da)的目的蛋白定位在細胞外(wai)周質腔，同時在C端(duan)具有His標簽。本產品(pin)提供pET-22b(+)經(jing)EcoRⅠ酶切后的線性化載(zai)體(ti)，可用無縫克隆技術將單個或多個DNA片段組裝到(dao)載(zai)體(ti)上。
無(wu)縫克(ke)隆技(ji)術(shu)(shu)可在重組酶的作(zuo)(zuo)用(yong)下，只需一步(bu)反應，便(bian)可將片(pian)(pian)段(duan)克(ke)隆到任何載體中的任意位置，得到重組質(zhi)粒。無(wu)縫克(ke)隆技(ji)術(shu)(shu)作(zuo)(zuo)為一種非常(chang)強大的克(ke)隆技(ji)術(shu)(shu)，具有快速(su)、 簡便(bian)、高效、多(duo)片(pian)(pian)段(duan)組裝和定向(xiang)克(ke)隆等特點，用(yong)于單(dan)個(ge)(ge) DNA 片(pian)(pian)段(duan)的克(ke)隆，多(duo)個(ge)(ge) DNA 片(pian)(pian)段(duan)組裝克(ke)隆以(yi)及(ji)多(duo)位點突變構建等實驗目的。
產品特點：
1. pET-22b(+)載體(ti)為原核(he)表達載體(ti)，具有N-PelB signal seqence和C-His標簽。
2. pET-22b(+)經EcoRⅠ酶切(qie)后(hou)的線性化載體，省時省力。
3. 無縫克(ke)隆技術只需要簡單的 PCR 擴增就(jiu)可以制(zhi)備片段DNA。
4. 可以克隆長片段和多(duo)片段DNA。
5. 簡單、快(kuai)速、精確、定向克隆。
操作步驟：
1. pET-22b(+)線性化載體使用方(fang)法：
(1) pET-22b(+)線(xian)性化載(zai)(zai)體當做克隆(long)載(zai)(zai)體使用，可以在(zai)擴(kuo)增(zeng)PCR產物的
上游(you)引物(wu) 5’端添加序列：CGCTGCCCAGCCGGCGATGGCCATG
下游引物 5’端添加序(xu)列：CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG
通過無縫克隆連接到pET-22b(+)中(zhong)。
(2) 測序引(yin)物
T7: 5'-TAATACGACTCACTATAGGG-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
(3) pET-22b(+)線性化(hua)載(zai)體為 EcoRⅠ酶(mei)切后(hou)的線性化(hua)載(zai)體，圖(tu)譜及多克隆位點見下圖(tu)。