pET-32a(+) Seamless Cloning Kit（線性化質粒）

商品屬性：

產(chan)品名稱	規格	貨號
pET-32a(+) Seamless Cloning Kit（線性化質粒）	20 μl	BJ-PJ6548

商品(pin)介紹(shao)：

產品介紹：
pET-32a(+)載體(ti)為高水平(ping)的原核表(biao)達(da)載體(ti)，在N端(duan)含(han)有TrxA(Trx-tag，硫(liu)氧還(huan)蛋白標簽(qian))有利于蛋白的可(ke)溶性表(biao)達(da)。pET-32a(+)在N端(duan)還(huan)含(han)有His-Tag, Thrombin（凝血酶(mei)(mei)(mei)）酶(mei)(mei)(mei)切位點，S-Tag，Enterokinase(腸激(ji)酶(mei)(mei)(mei))酶(mei)(mei)(mei)切位點，在C端(duan)具(ju)有His-Tag。本(ben)產品提供pET-32a(+)經EcoRⅠ酶(mei)(mei)(mei)切后(hou)的線性化(hua)載體(ti)，可(ke)用無縫(feng)克隆技(ji)術(shu)將單個或多個DNA片段組裝到(dao)載體(ti)上。
無(wu)縫(feng)克(ke)(ke)(ke)隆(long)(long)技術(shu)可(ke)在重組(zu)酶的(de)作用下，只(zhi)需(xu)一(yi)步反應(ying)，便可(ke)將片(pian)段克(ke)(ke)(ke)隆(long)(long)到任(ren)何(he)載體中的(de)任(ren)意位置，得到重組(zu)質粒(li)。無(wu)縫(feng)克(ke)(ke)(ke)隆(long)(long)技術(shu)作為一(yi)種非常強大的(de)克(ke)(ke)(ke)隆(long)(long)技術(shu)，具有快速、簡(jian)便、高效、多片(pian)段組(zu)裝和定向克(ke)(ke)(ke)隆(long)(long)等特點，用于(yu)單個(ge)DNA片(pian)段的(de)克(ke)(ke)(ke)隆(long)(long)，多個(ge)DNA片(pian)段組(zu)裝克(ke)(ke)(ke)隆(long)(long)以及多位點突(tu)變構(gou)建等實驗目(mu)的(de)。
產品特點：
1. pET-32a(+)載體為原核表達載體，具有N-TrxA, N-His，N-Thrombin, N-S，N-Enterokinase和C-His。
2. pET-32a(+)經EcoRⅠ酶切后的線(xian)性化載體，省時省力(li)。
3. 無縫克(ke)隆技術只需(xu)要簡(jian)單(dan)的 PCR 擴增就可以制備片段(duan)DNA。
4. 可以克(ke)隆長片(pian)段和多片(pian)段DNA。
5. 簡單、快速、精確、定向克隆。
操作步驟：
1. pET-32a(+)線性化載(zai)體(ti)使用方法：
(1) pET-32a(+)線性化載體(ti)當做(zuo)克隆載體(ti)使用，可以在(zai)擴增PCR產物的
上游引物 5’端添加序列：GTACCGACGACGACGACAAGGCCATG
下(xia)游引物 5’端添(tian)加序列：CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG
通過(guo)無縫克隆連接到pET-32a(+)中。
(2) 測(ce)序引物(wu)
PET-32A-SEQR: 5'-CTGGTTCTGGCCATATGCAC-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
(3) pET-32a(+)線性化載體為 EcoRⅠ酶切后的(de)線性化載體