T4 DNA Ligase（T4連接酶）

商品屬性(xing)：

產品名稱	規格	貨(huo)號
T4 DNA Ligase（T4連接酶）	500U	BJ-PJ6551

商(shang)品介(jie)紹(shao)：

濃    度(du)： 5U/μl
產品概述：
在(zai)有(you)Mg2+和ATP存(cun)在(zai)的(de)條件下，T4 DNA Ligase能催(cui)化(hua)雙(shuang)鏈 DNA或RNA上相(xiang)鄰的(de)5′-磷酸末(mo)端(duan)和3′-羥基(ji)末(mo)端(duan)形(xing)成磷酸二酯鍵。該酶不僅能夠催(cui)化(hua)雙(shuang)鏈DNA的(de)平末(mo)端(duan)或粘性(xing)末(mo)端(duan)之間的(de)連接，還可以修復(fu)雙(shuang)鏈 DNA、RNA 或 DNA/RNA 雜(za)交雙(shuang)鏈中的(de)單(dan)鏈切刻，但不能催(cui)化(hua)單(dan)鏈 DNA 之間的(de)連接。
保存條件：-20℃保存。
酶儲存緩沖液：
10 mM Tris-HCl (pH 7.5) ，50mM KCl，1mM DTT， 0.1mM EDTA，50% (v/v) glycerol。
5 × T4 DNA Ligase Buffer
250 mMTris-HCl (pH 7.5)， 50mM MgCl2，50mM DTT， 5mM ATP，連接(jie)促進劑。
來     源：純(chun)化(hua)于攜帶T4 DNA ligase 基因 的E. coli 菌株。
抑制劑和熱失活：
大(da)于(yu)200mM的NaCl或KCl可以(yi)強烈抑制連接酶(mei)活性。65℃加熱 10分鐘(zhong)或70℃加熱5分鐘(zhong)即(ji)可失活。
單位定義：
在(zai)37℃，20分(fen)鐘內交換1 nmole 的(de)(de)32PPi所(suo)需要的(de)(de)酶(mei)(mei)量(liang)定義為(wei)一(yi)(yi)個Weiss單(dan)(dan)位(wei)。本產品(pin)酶(mei)(mei)1U(Weiss Unit)相當(dang)于200個粘(zhan)性(xing)末端(duan)單(dan)(dan)位(wei)。在(zai)T4 DNA 連接(jie)酶(mei)(mei)反應緩(huan)沖液(ye)中，16℃條件下(xia)，30分(fen)鐘能夠使50%的(de)(de)經Hind III消化的(de)(de)λDNA 片(pian)段連接(jie)所(suo)需要的(de)(de)酶(mei)(mei)量(liang)為(wei)一(yi)(yi)個粘(zhan)性(xing)末端(duan)單(dan)(dan)位(wei)。
質量控制：
藍(lan)白(bai)斑分析實(shi)驗(yan)表(biao)明白(bai)斑數小于2%;過量T4 DNA Ligase 混(hun)合超螺旋質粒檢測(ce)實(shi)驗(yan)表(biao)明無核(he)酸(suan)酶檢出；SDS-PAGE檢測(ce)重(zhong)組蛋白(bai)純度(du)大于99%。