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Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)無甘油商(shang)品(pin)屬性:
產(chan)品名稱
規(gui)格
貨號
Bst 3.0 DNA/RNA聚合酶(32U/ul)無甘油
16KU
BJ-PJ6560
商(shang)品介紹(shao):描述:與Bst 2.0 DNA 聚合酶(mei)(mei)(mei)和(he)Bst DNA 聚合酶(mei)(mei)(mei)大片段相比,Bst 3.0 DNA聚合酶(mei)(mei)(mei)具(ju)有(you)更佳的(de)(de)等溫(wen)擴增活(huo)性(xing)(xing)和(he)更強的(de)(de)逆轉(zhuan)錄活(huo)性(xing)(xing)。無論以DNA還是(shi)RNA為(wei)模板,該酶(mei)(mei)(mei)都具(ju)有(you)5’-3’的(de)(de)DNA聚合酶(mei)(mei)(mei)活(huo)性(xing)(xing)和(he)強烈的(de)(de)鏈置換活(huo)性(xing)(xing),但該酶(mei)(mei)(mei)5’-3’和(he)3’-5’的(de)(de)外切酶(mei)(mei)(mei)活(huo)性(xing)(xing)缺失。
在以RNA為模板的(de)LAMP實驗中,可實現單(dan)酶(mei)系統反應。該酶(mei)在60-65°C之(zhi)間具有很好的(de)反轉錄活(huo)性,可有效解決具有二(er)級復雜結構的(de)RNA模板的(de)反轉錄,而Bst 2.0 DNA 聚(ju)合(he)酶(mei)和(he)Bst DNA 聚(ju)合(he)酶(mei)大片段無此活(huo)性。
單位定義:
一個活力單位即在 65°C 條件下,30 分鐘內催化 10 nmoldNTP 的摻(chan)入反應成為酸不溶性物質所需的酶量。
儲存:-20℃ 可保存 3 年(nian)。
典型的 LAMP 反應
1. 按以(yi)下組分配制(zhi) LAMP 反應液Bst 3.0 DNA/RNA Polymerase (32 U/μl) 0.05~0.25 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板(ban) DNA/RNA 10ng~1 μg
*10X Primers 2.5μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers:16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM LoopF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活(huo)。
使用注意事項:
(1) Mg2+的(de)使用濃(nong)度(du)為 4~10 mM 濃(nong)度(du),Isothermo Buffer中(zhong)沒有 Mg2+,通常(chang)情況下,在 6-8 mM Mg2+條件下可獲得較好的(de) LAMP 結果。
(2) 有(you)文獻報道加(jia)入(ru) Tte Uvrd 解旋酶可改善(shan) LAMP 的效(xiao)果。
(3) 使(shi)用無模板(ban) DNA 作為對照檢(jian)測擴增(zeng)的特異性。
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