HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(熒光凍干球)

商品屬性：

產品名稱	規格	貨(huo)號
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead(熒光凍干球)	100Tx25μl	BJ-PJ6574

商品(pin)介紹：

描述：

本品(pin)(pin)為 LAMP 熒光檢(jian)測專用(yong)的試劑，制品(pin)(pin)為全(quan)體(ti)系(xi)凍(dong)干微球制品(pin)(pin)，包含(han)了 HotStart Bst4.2 DNA/RNA 聚合酶、SYBR Green 染料、Helicaser、dNTP、Mg2+、反應緩沖鹽(yan)，單(dan)球擴(kuo)增體(ti)系(xi)為 25 μl。

Bst4.2 具有以下性能：

（1）Bst 4.2 全系包含熱啟(qi)動(dong)Aptamer，該配體(ti)確保酶在(zai)<30℃時，酶活(huo)封(feng)閉效率(lv)>95%,在(zai)>60℃時 1min 內(nei)完全釋放酶活(huo)。該特(te)性(xing)利于室(shi)溫建(jian)立反應(ying)體(ti)系，并大幅(fu)降(jiang)低了低溫條(tiao)件下的非特(te)異擴(kuo)增(zeng)；

（2）反(fan)應溫度提升到 70℃，大幅(fu)降低引(yin)物 Dimer 的形成，提高(gao)擴(kuo)增特異性，并(bing)使(shi)得粗(cu)樣品核酸釋放(fang)更加充分；

（3）全系包含 Helicaser，因此，允許在不使用 F3/B3 引物的情況下進行 LAMP 擴增（easy LAMP），并允許 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。這將進一步降低非特異擴增，并使得擴增均一性大幅提升。

儲存：-20℃干燥密封保存 24 個月；室溫（25℃）密封保存 12 個月。避免受潮。
特殊說明：
（1） Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 擴增時的推薦反應溫度為 65-70℃，最佳反應溫度為 70℃。因此其可完全替代  的 Bst4.0 系列，用于標準 LAMP的擴增。
（2） 由于 Helicaser 的反應溫度為 70℃，因此在進行eLAMP 擴增時，反應溫度為 70℃。
（3）制品中包含高濃度的鹽組分，使用時做好個人防護，防止制品與皮膚、眼、鼻、呼吸道等接觸和吸入，一旦接觸或吸入，請用大量的清水沖洗。
（4）防止氣溶膠污染，盡可能進行分區操作。
1. 標準 LAMP 和 eLAMP 擴增的區別本試劑既可以用于標準 LAMP 擴增，也可以用于 eLAMP擴增。
1.1 10x 標準 LAMP Primer MixFIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4 μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 10xeLAMP Primer MixFIP/BIP=8 μM each; LF/LB=4 μM each
注意：eLAMP（easy LAMP）為去除 F3/B3 引物的方法，為 Bst4.2系列專用的使用策略，對于大多數引物組，在 Helicaser 的加持下，擴增速度幾乎不受影響。如引物擴增效率低，可提高 FIP/BIP 濃度到 12~16 μM。
1.3 擴增溫度不同
標準 LAMP 擴增 eLAMP 擴增
65-70°C 均可 70°C 反應
2. 配制 LAMP 反應體系
HotStart Bst 4.2 SYBR Green Bead 1 個
10x Primer Mix 2.5 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到總體積 25 μl
反應(ying)體系配好后，置(zhi)于 65-70°C 反應(ying) 20~30min，1min 收集一次(ci)熒光信號(hao)。讀(du)取擴增曲線進行陰性和(he)陽性判(pan)讀(du)。