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6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit商品屬性:
產品名稱
規格
貨號
6min Fast 1st cDNA Synthesis Kit
100T
BJ-PJ6631
商品介(jie)紹:描述:本試劑(ji)盒采用(yong)穩定高(gao)效的(de)反(fan)轉(zhuan)錄(lu)預(yu)混(hun)體系 5×Fast RT MasterMix 進行 RNA 的(de)反(fan)轉(zhuan)錄(lu)反(fan)應(ying),使(shi)(shi)用(yong)時只(zhi)需加入模板、 引(yin)物和(he) RNase Free H2O 即可,大大簡化(hua)了(le)操(cao)作過(guo)程(cheng)、提(ti)高(gao) 了(le)效率(lv)、減少了(le)操(cao)作過(guo)程(cheng)中的(de)人為誤差。 該預(yu)混(hun)體系包含快(kuai)速 MLV7 反(fan)轉(zhuan)錄(lu)酶、dNTP、反(fan)應(ying) Buffer 和(he) RNase Inhibitor。該試劑(ji)盒采用(yong)的(de) MLV7 反(fan)轉(zhuan)錄(lu)酶 具(ju)有(you)以(yi)下特性(xing)(xing)(xing):RNase H 活性(xing)(xing)(xing)缺(que)失,從(cong)而(er)避免反(fan)轉(zhuan)錄(lu)過(guo)程(cheng)中 降解 RNA;經過(guo)突變文庫(ku)篩選,使(shi)(shi)得其熱穩定性(xing)(xing)(xing)更強,可耐 受 50℃ 高(gao)溫反(fan)應(ying),在 60℃ 條件(jian)下仍然具(ju)有(you) 30%以(yi)上活性(xing)(xing)(xing), 利(li)于(yu)(yu)打開 RNA 二(er)級結構(gou),從(cong)而(er)提(ti)高(gao)復雜 RNA 模板的(de)擴(kuo)增性(xing)(xing)(xing) 能;含有(you)快(kuai)速合成(cheng)結構(gou)域,將 MLV 的(de)延伸(shen)速度提(ti)高(gao)了(le) 3-4 倍(bei),因此適用(yong)于(yu)(yu)快(kuai)速反(fan)轉(zhuan)錄(lu)反(fan)應(ying);優化(hua)的(de)反(fan)轉(zhuan)錄(lu) Buffer 系統(tong), 可以(yi)獲得更高(gao)產量的(de) cDNA,從(cong)而(er)提(ti)高(gao)后續檢(jian)測(ce)的(de)靈敏度。 合成(cheng)的(de)第(di)一(yi)鏈 cDNA 可廣泛(fan)用(yong)于(yu)(yu) 2nd Strand 的(de)合成(cheng)、雜交、 PCR 擴(kuo)增、Real-Time PCR 反(fan)應(ying)等。
應用:
(1)該制品可有效反轉錄 mRNA、tRNA、LncRNA、ncRNA
(2)該制品不可反轉錄 microRNA
組分
儲存:請置于-20°C,可保存 3 年;避免反復凍融。
1. 按以下組分配制反轉錄反應液
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
5×Fast RT MasterMix 4 μl
*20×Oligo dT(25)&Random Primer 1 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*注:反轉錄引物可根據需要改用特異性引物。
2.反應程序
50°C 5 min(cDNA 合成)
95°C 1 min(失活 MLV)
3. 采用 0.25-2μl 反轉錄產(chan)物(wu),作(zuo)為(wei)后續定量 PCR 或 PCR的擴增模板即可。
