Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit

商品屬性：

產品(pin)名稱	規格	貨號(hao)
Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit	100T	BJ-PJ6632

商(shang)品介紹：

描述：本試劑盒(he)采(cai)用穩(wen)定高(gao)效(xiao)的(de)(de)反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)預混(hun)體系(xi) 5×Golden RT MasterMix 進行 RNA 的(de)(de)反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)反(fan)(fan)應(ying)，使(shi)用時只需加(jia)入模 板、引物和(he) RNase Free H2O 即可(ke)，大(da)大(da)簡(jian)化了(le)操(cao)作過(guo)程、 提高(gao)了(le)效(xiao)率、減少了(le)操(cao)作過(guo)程中的(de)(de)人(ren)為誤差。具有快速簡(jian)便、 重復性(xing)(xing)高(gao)、特異性(xing)(xing)好、靈敏度(du)高(gao)和(he)穩(wen)定性(xing)(xing)好的(de)(de)特點。專用于 病毒(du) DNA/RNA 樣品(pin)的(de)(de)反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)反(fan)(fan)應(ying)。 該(gai)(gai)預混(hun)體系(xi)包含點突變致 RNase H 活性(xing)(xing)缺(que)失的(de)(de) Golden MLV Reverse Transcriptase 反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)酶、dNTP、反(fan)(fan)應(ying) Buffer 和(he) RNase Inhibitor。該(gai)(gai)試劑盒(he)采(cai)用的(de)(de)反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)酶去除了(le) RNase H 活性(xing)(xing)，從(cong)而避免反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)過(guo)程中降解(jie) RNA。同(tong)時經過(guo)突變文 庫篩選，使(shi)得(de)其熱穩(wen)定性(xing)(xing)更強(qiang)，可(ke)耐受 55℃高(gao)溫(wen)反(fan)(fan)應(ying)。相比 于低溫(wen)條件下反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)反(fan)(fan)應(ying)，采(cai)用高(gao)溫(wen)反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)(lu)可(ke)顯(xian)著打開 RNA 二(er)級結構(gou)，從(cong)而提高(gao)復雜 RNA 模板的(de)(de)擴增性(xing)(xing)能、提高(gao)反(fan)(fan)轉(zhuan)(zhuan) 錄(lu)(lu) cDNA 的(de)(de)長度(du)和(he)產量，從(cong)而提高(gao)后續檢測的(de)(de)靈敏度(du)。合成 的(de)(de)第一(yi)鏈 cDNA 可(ke)廣泛用于 2nd Strand 的(de)(de)合成、雜交、PCR 擴增、Real-Time PCR 反(fan)(fan)應(ying)等(deng)。

組分

儲存：請置于-20°C，可保存 3 年；避免反復凍融。
注：如 5×Golden RT MasterMix 出現沉淀屬正常現象，可用手捂化，混合均勻后使用不影響實驗結果。一步法 cDOn
1. 按以下組分配制反轉錄反應液
病毒 DNA/RNA 樣品 2~10μl
5×Golden RT MasterMix 4μl
*20×Random Primer 1μl
Rnase Free H2O Up to 20μl
*注：反轉錄引物可根據需要改用特異性引物。
2.根據實際情況反轉錄可選擇快速程序或標準程序
快速程序
 37°C 15~30min（cDNA 合成）
 85°C 5min（失活 MLV）
標準程序
 25°C 10min（引物配對）
 55°C 30~60min（cDNA 合成）
 85°C 5min（失活 MLV）
注：通常在(zai)定量 PCR 實驗(yan)中使用(yong)(yong)快速程序進行反(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)（反(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)效(xiao)率(lv)>80%），在(zai)進行高 GC 含(han)量、含(han)復雜二(er)級結構、長片段的模板(ban)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)時采用(yong)(yong)標準(zhun)程序（反(fan)轉(zhuan)(zhuan)錄(lu)效(xiao)率(lv)>100%）。