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Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit商品屬性:
產品名稱
規格
貨號
Virus DNA/RNA cDNA Synthesis Kit
100T
BJ-PJ6632
商品介紹:描述:本試劑盒采用穩定高效的反轉錄預混體系 5×Golden RT MasterMix 進行 RNA 的反轉錄反應,使用時只需加入模 板、引物和 RNase Free H2O 即可,大大簡化了操作過程、 提高了效率、減少了操作過程中的人為誤差。具有快速簡便、 重復性高、特異性好、靈敏度高和穩定性好的特點。專用于 病毒 DNA/RNA 樣品的反轉錄反應。 該預混體系包含點突變致 RNase H 活性缺失的 Golden MLV Reverse Transcriptase 反轉錄酶、dNTP、反應 Buffer 和 RNase Inhibitor。該試劑盒采用的反轉錄酶去除了 RNase H 活性,從而避免反轉錄過程中降解 RNA。同時經過突變文 庫篩選,使得其熱穩定性更強,可耐受 55℃高溫反應。相比 于低溫條件下反轉錄反應,采用高溫反轉錄可顯著打開 RNA 二級結構,從而提高復雜 RNA 模板的擴增性能、提高反轉 錄 cDNA 的長度和產量,從而提高后續檢測的靈敏度。合成 的第一鏈 cDNA 可廣泛用于 2nd Strand 的合成、雜交、PCR 擴增、Real-Time PCR 反應等。
組分
儲存:請置于-20°C,可保存 3 年;避免反復凍融。
注:如 5×Golden RT MasterMix 出現沉淀屬正常現象,可用手捂化,混合均勻后使用不影響實驗結果。一步法 cDOn
1. 按以下組分配制反轉錄反應液
病毒 DNA/RNA 樣品 2~10μl
5×Golden RT MasterMix 4μl
*20×Random Primer 1μl
Rnase Free H2O Up to 20μl
*注:反轉錄引物可根據需要改用特異性引物。
2.根據實際情況反轉錄可選擇快速程序或標準程序
快速程序
37°C 15~30min(cDNA 合成)
85°C 5min(失活 MLV)
標準程序
25°C 10min(引物配對)
55°C 30~60min(cDNA 合成)
85°C 5min(失活 MLV)
注:通常在定量 PCR 實驗中使用快速程序進行反轉錄(反轉錄效率>80%),在進行高 GC 含量、含復雜二級結構、長片段的模板轉錄時采用標準程序(反轉錄效率>100%)。
