Hi T7高產RNA合成試劑盒

商品屬性：

產品名(ming)稱	規格	貨號(hao)
Hi T7高產RNA合成試劑盒	25T	BJ-PJ6634

商品(pin)介紹：

描述：Hi T7 高產(chan) RNA 合成(cheng)試(shi)劑盒(he)可(ke)在(zai)體(ti)外(wai)高效合成(cheng)多種類(lei) 型的 RNA 如(ru) mRNA、lncRNA、shRNA 等(deng)(deng)。利用 Hi T7 RNA 聚合酶識別 T7 promoterTTCTAATACGACTCACTATAG G）以(yi)方框(kuang)中 G 堿基為起點開(kai)始轉(zhuan)錄(lu)，該試(shi)劑盒(he)可(ke)以(yi)從少量 樣本得到高效轉(zhuan)錄(lu)，單(dan)次反應(ying)(ying)可(ke)獲得高達 150-200 μg 的產(chan) 物，轉(zhuan)錄(lu)長(chang)度可(ke)達 4000nt 以(yi)上。 利用該試(shi)劑盒(he)得到的 RNA 適用于(yu)多種下(xia)游應(ying)(ying)用，如(ru) RNA 結構(gou)和功能研究、核酸酶生物化(hua)學研究、RNase 保護 分(fen)析(xi)探針(zhen)、印(yin)跡雜交(jiao)、反義 RNA 及 RNAi 實驗、微陣列 分(fen)析(xi)、顯微注射(she)、體(ti)外(wai)翻譯和 RNA 疫(yi)苗等(deng)(deng)。 Hi T7 高產(chan) RNA 合成(cheng)試(shi)劑盒(he)使用方便，使用優化(hua)好(hao)的預(yu) 混液，有利于(yu)用戶快(kuai)速(su)建立反應(ying)(ying)。本試(shi)劑盒(he)還配備了 DNase I，在(zai) RNA 合成(cheng)完畢后可(ke)快(kuai)速(su)去(qu)除 DNA 模板，便于(yu)獲得高 純度轉(zhuan)錄(lu) RNA。

組分：

(1) 2×Hi T7 Trans Solution 中包含反應 Buffer、rNTP。
(2) T7 Trans Enzyme Mix 中包含 Hi T7 RNA 聚合酶、
Rnase Inhibitor 等。
保存：
-20℃可保存 2 年，避免反復凍融。
操作步驟：
（1） 按以下組分配制反應液
2×Hi T7 Trans Solution 10 μl
DNA（RNase Free） 0.5~1 μg
Hi T7 Trans Enzyme Mix 1.5 μl
RNase Free H2O upto 20 μl
（2）37℃反應 4h，轉錄 RNA 產量在 120~200 μg。
（3） 轉錄完畢后，向反應液中加入 2.5 μl 的 10xRD Buffer和 2 μl 的 RNase Free DNase I，37℃孵育 15min，以去除DNA 模板。
（4）整個反應完畢后可取 0.05~0.1 μl 轉錄(lu)產物進行電泳(yong)檢測(ce)，并凍(dong)存(cun)于-80℃保存(cun)。選用(yong) LiCl 沉淀純(chun)(chun)化或 5min RNAPurification Kit 進行轉錄(lu) RNA 的純(chun)(chun)化，以(yi)去除鹽、rNTP、蛋白等(deng)。