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Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer商品屬性:
產品名稱(cheng)
規格
貨(huo)號(hao)
Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer
100ml
BJ-PJ6652
商品介紹:
對目的蛋白進行檢測分析時,總蛋白的提取至關重要,如蛋白提取不好會導致后續試驗的不理想甚至失敗,如:信號極弱或無雜交信號、背景高、非特異性條帶多等.根據目標蛋白的類型和實驗應用種類來選擇合適的RIPA裂解液,才能最大程度地保證后續實驗的成功。 Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer對(dui)細(xi)(xi)胞有一定的(de)裂(lie)(lie)解能(neng)力(li)(li),能(neng)獲(huo)得較(jiao)多(duo)的(de)胞漿蛋白,而(er)(er)對(dui)細(xi)(xi)胞核(he)的(de)裂(lie)(lie)解能(neng)力(li)(li)有限,不能(neng)完全裂(lie)(lie)解細(xi)(xi)胞核(he),因(yin)此獲(huo)得的(de)總蛋白適用(yong)于IP或CO-IP實驗;而(er)(er)WB Super RIPA Lysis Buffer對(dui)動物組(zu)織和(he)細(xi)(xi)胞的(de)裂(lie)(lie)解能(neng)力(li)(li)極強(qiang),它可以完全裂(lie)(lie)解細(xi)(xi)胞核(he)和(he)線粒體(ti),并可提取到更(geng)多(duo)的(de)膜蛋白,從而(er)(er)可獲(huo)得更(geng)多(duo)的(de)總蛋白。因(yin)其(qi)超強(qiang)的(de)裂(lie)(lie)解能(neng)力(li)(li),使(shi)(shi)得大(da)量的(de)基(ji)因(yin)組(zu)DNA從細(xi)(xi)胞核(he)中(zhong)釋放出(chu)來,使(shi)(shi)蛋白變的(de)十分粘稠,使(shi)(shi)用(yong)Benzonase核(he)酸酶(mei)消化(hua)可有效解決(jue)。RIPA裂(lie)(lie)解液獲(huo)得得蛋白可用(yong)BCA蛋白濃(nong)度測(ce)定試劑(ji)盒(he)測(ce)定蛋白濃(nong)度;使(shi)(shi)用(yong)Bradford法測(ce)定由(you)本裂(lie)(lie)解液裂(lie)(lie)解所得到樣品的(de)蛋白濃(nong)度會稍有誤差。
1.可很好的釋放胞漿蛋白,部分釋放膜蛋白和核蛋白。
2.經Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer,核蛋白與DNA還緊密
結合在一起,離心后會造成核蛋白的丟失。
3.對于膜蛋白,Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer的破壞力
小,不能使膜蛋白與膜充分分離,故離心后造成膜蛋白
的丟失。
4.在提取蛋白過程中,基因組DNA釋放使得蛋白提取液
變的十分粘稠,影響蛋白電泳和雜交效果。1.可以很好的裂解細胞膜及細胞核,從而更好的完全釋放胞漿蛋白、核蛋白和膜蛋白。
2.對于核蛋白,經WB Super RIPA Lysis Buffer裂解后,核蛋白與粘稠的基因組DNA分離,離心后核蛋白存在于上清中,核蛋白的捕獲率高達90%。
3.對于膜蛋白,WB Super RIPA Lysis Buffer可最大程度的破壞細胞膜和變性蛋白,使蛋白與膜分離,防止蛋白與膜復合物在離心后沉淀,從而防止蛋白丟失。
4.在提取蛋白過程中,基因組DNA釋放使得蛋白提取液變的十分粘稠,使用Benzonase核酸酶消化可有效解決。儲存
置于室溫陰涼處,可保存2年。 實例
Fig.用WB Super RIPA Lysis Buffer和Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer分別提取核蛋白PPARγ和膜蛋白PLD-1,上樣量分別為40ug和10ug總蛋白,ECL發光液顯色。A/C泳道為WB Super RIPA Lysis Buffer,B/D泳道為Co-IP/IP RIPA Lysis Buffer。由此圖比較分析表明WB Super RIPA Lysis Buffer能更充分的釋放核蛋白和膜蛋白,從而獲得更強的信號。
