BCA Protein Assay Kit

商品屬性：

產(chan)品(pin)名(ming)稱	規格	貨(huo)號
BCA Protein Assay Kit	50-500T	BJ-PJ6655

商品介紹(shao)：

描述：BCA 蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)定量試(shi)劑(ji)盒(BCA Protein Assay Kit)是根 據目前世(shi)界上(shang)最(zui)常用(yong)的蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)濃(nong)度檢(jian)測(ce)方法之一(yi)－BCA （bicinchoninic acid）法改良研制而(er)成(cheng)，該試(shi)劑(ji)盒具有(you)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai) 濃(nong)度測(ce)定的簡單性(xing)(xing)(xing)，高穩定性(xing)(xing)(xing)，高靈敏度和高兼(jian)容(rong)性(xing)(xing)(xing)。本(ben)試(shi) 劑(ji)盒的原理是蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)分子中的肽鍵結構在(zai)堿性(xing)(xing)(xing)環境下(xia)能與 Cu2+絡(luo)合(he)(he)生成(cheng)絡(luo)合(he)(he)物(wu)，將 Cu2+還原成(cheng) Cu+，而(er) BCA 試(shi)劑(ji)可(ke)(ke)(ke) 敏感(gan)特異地與 Cu+結合(he)(he)，形成(cheng)穩定的有(you)顏色的復(fu)(fu)合(he)(he)物(wu)，并在(zai) 562nm 處有(you)最(zui)大(da)光吸收值，該復(fu)(fu)合(he)(he)物(wu)顏色深淺與蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)濃(nong)度 成(cheng)正比，可(ke)(ke)(ke)根據吸收值的大(da)小來測(ce)定蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)的含量，1 小時內 即(ji)可(ke)(ke)(ke)完成(cheng)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)定量檢(jian)測(ce)。本(ben)試(shi)劑(ji)盒含有(you)牛血(xue)清白(bai)(bai)蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)（BSA） 溶(rong)液作為蛋(dan)(dan)(dan)(dan)白(bai)(bai)質(zhi)標準溶(rong)液，測(ce)定范圍為 25～2000 μg/ml。該 試(shi)劑(ji)盒可(ke)(ke)(ke)用(yong)于 20 次(ci)試(shi)管檢(jian)測(ce)或 200 次(ci) ELISA 板檢(jian)測(ce)。

操作方法
1. 標準品的稀釋：按下表將 BSA 進行稀釋。
管號 PBS
BSA 體積
（來源）
BSA 終濃度
（μg/ml）
A 0 300 μl (母液) 2000
B 125 μl 375 μl (母液) 1500
C 325 μl 325 μl (母液) 1000
D 175 μl 175 μl (B 管) 750
E 325 μl 325 μl (C 管) 500
F 325 μl 325 μl (E 管) 250
G 325 μl 325 μl (F 管) 125
H 400 μl 100 μl (G 管) 25
I 400 μl 0 0
2. BCA 工作液的配置：根據樣品數量及測定方法，將 BCA Reagent A 和 BCA Reagent B 按體積比 50:1充分混勻即可。
注意：配制 BCA 工作液前請將 BCA Reagent A 混勻。
3. 標準比色杯測定方法
(1)吸取 0.1 ml 的各標準品和待測樣品置于合適的管中。
(2)加入 2 ml BCA 工作液，充分混勻。
(3)37℃孵育 30 min，然后室溫靜置 10 min。
(4)紫外分光光度計于 562 nm 處檢測吸光度。
(5)繪制標準曲線。
(6)根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
4. 微管測定方法
(1)分別取 25 μl 新鮮配制的 BSA 標準液和待測樣品，加入到 ELISA 反應板中。
(2)每孔加入 200 μl BCA 工作液，充分混勻。
(3)37℃孵育 30 min，然后室溫靜置 10 min。
(4)酶標儀于 562nm 處檢測吸光度。
(5)繪制標準曲線。
(6)根據標準曲線計算出樣品的蛋白濃度。
注意事項
1. 待測樣品濃度在 25~2000 μg/ml 的范圍內具有良好的線性關系。
2. BCA 工作液配制后 24 小時內使用效果穩定。
3. BCA 法測定蛋白濃度時，吸光度會隨著時間的延長不斷加深。并且顯色反應會因溫度升高而加快。如果濃度較低，適合在較高溫度孵育，或延長孵育時間。
4. 使用普通的分光光度計測定時，需根據比色皿的最小檢測體積，適當加大 BCA 工作液的用量，使其不小于最小檢測體積，樣品和標準品的用量可相應按比例調整。
5. 適用范圍

實(shi)例(li)(li)操作 按上述操作方(fang)(fang)法可得到(dao)如下標準工作曲線，該線性(xing)方(fang)(fang)程(cheng)經過 多次繪制，系數(shu)均(jun)為(wei)(wei) 0.0001，且 R 2 值(zhi)均(jun)在(zai)(zai) 0.99~1 之(zhi)間， 重復性(xing)好，在(zai)(zai)計算蛋白(bai)濃(nong)度(du)(du)時(shi)(shi)可直接用該標準工作曲線進行(xing) 計算。例(li)(li)如：在(zai)(zai) 562 nm 處(chu)檢測吸光值(zhi)為(wei)(wei) 0.1，則此時(shi)(shi) y 值(zhi) 為(wei)(wei) 0.1，代入方(fang)(fang)程(cheng) y=0.0001x 中(zhong)，可得蛋白(bai)濃(nong)度(du)(du)為(wei)(wei) 1000 μg/ml。