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Exonuclease III商品屬性(xing):
產(chan)品名稱(cheng)
規格
貨號
Exonuclease III
5000U
BJ-PJ6683
商(shang)品介紹:描述: 核(he)(he)酸(suan)外切(qie)(qie)酶(mei)(mei) III 來源于 E.coli,具有 3′-5′外切(qie)(qie)酶(mei)(mei)活(huo)性(xing),它作用于雙(shuang)(shuang)鏈(lian) DNA,從 3′ OH 末端方(fang)向逐步切(qie)(qie)去單核(he)(he)苷(gan)(gan)酸(suan);每次酶(mei)(mei)與底(di)(di)物結合催化,只有幾個核(he)(he)苷(gan)(gan)酸(suan)被除掉,從而(er)在(zai) DNA 分(fen)(fen)子(zi)群(qun)內產生漸(jian)進缺(que)失。該酶(mei)(mei)的最佳底(di)(di)物為平末端、5′突(tu)出(chu)末端雙(shuang)(shuang)鏈(lian) DNA 分(fen)(fen)子(zi),但(dan)也可作用于雙(shuang)(shuang)鏈(lian) DNA 的缺(que)刻(ke)處,從 3′降解 DNA 分(fen)(fen)子(zi),釋放 5′單核(he)(he)苷(gan)(gan)酸(suan)。對于 3′突(tu)出(chu)末端,尤其是(shi)多于 4nt 的幾乎完全不(bu)切(qie)(qie)割, 亦不(bu)能切(qie)(qie)割硫代磷酰脂鍵。核(he)(he)酸(suan)外切(qie)(qie)酶(mei)(mei) III 的活(huo)性(xing)部(bu)分(fen)(fen)依賴螺旋結構,并根據序列的不(bu)同 而(er)有差異(C>A=T>G)。另外,核(he)(he)酸(suan)外切(qie)(qie)酶(mei)(mei) III 還具有脫嘌呤/嘧(mi)啶-核(he)(he)酸(suan)內切(qie)(qie)酶(mei)(mei)活(huo)性(xing)、RnaseH 活(huo)性(xing)和 3′磷酸(suan)酶(mei)(mei)活(huo)性(xing)。
活性定義:50 μl 反應體系(xi)中,37℃ 條(tiao)件下,30 分鐘
催化 E.coli DNA 產(chan)(chan)生(sheng) 1 nmol 酸可溶性產(chan)(chan)物所需要的量定(ding)義為一個(ge)活性單位。
應用: 非定(ding)向巢(chao)式缺(que)失定(ding)點(dian)突變鏈(lian)特(te)異性(xing)探針的制備(bei)
制備用(yong)于雙脫(tuo)氧測序的單鏈底模(mo)板(ban)
熱失活:70°C,20min。
1X Exonuclease III Buffer: 10 mM Bis-Tris(pH 7.0),10
mM MgCl2,1 mM DTT。
酶儲存液:50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mM
DTT, 25% Glycerol.
儲存:置于-20°C 可保存 2 年,避免反復凍融。
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