15min高產全血基因組DNA提取試劑盒

商品屬性(xing)：

產品名稱	規格	貨號
15min高產全血基因組DNA提取試劑盒	50T	BJ-PJ6724

商品介紹：

描述：該試劑(ji)盒采用(yong)(yong)(yong)獨特的(de)裂解液，可快速可靠的(de)從抗(kang)凝全(quan)血樣本(ben)中純(chun)化出高(gao)純(chun)度的(de)基因組(zu) DNA，最(zui)大(da)限度的(de)去(qu)除蛋白、色素、脂類等雜(za)質污(wu)染。應用(yong)(yong)(yong)本(ben)試劑(ji)盒獲取的(de) DNA純(chun)度高(gao)，無抑(yi)制劑(ji)，A260/A280 為 1.6-1.9。應用(yong)(yong)(yong)本(ben)試劑(ji)盒提取的(de) DNA 可直接用(yong)(yong)(yong)于限制性酶切反應、PCR、文庫構建(jian)、Southern 雜(za)交等多種分子(zi)生物(wu)學實驗。

注意事項：
（1） 本試(shi)劑盒(he)中的(de) Washing Buffer 中已經加乙(yi)醇，無需(xu)單(dan)獨添加。
（2）gDNA LB1，儲存時可能會有白色結晶沉淀(dian)，放置(zhi)于56℃水(shui)浴鍋溶解后，不影響使(shi)用效果。
（3）蛋白酶 K（20 mg/ml）長期(qi)(qi)保存(cun)請(qing)儲(chu)存(cun)于(yu)-20℃，短期(qi)(qi)室溫(wen)保存(cun)（6 個月），其它(ta)組分儲(chu)存(cun)于(yu)室溫(wen)。
（4）該試(shi)劑(ji)盒(he)的保質期為 2 年。
操作方法
（1）樣本處理（1.5 或 2 ml EP 管(guan)中(zhong)處理）人抗凝(ning)全血：吸取(qu) 0.2~0.8 ml 抗凝(ning)全血加(jia)入到(dao) 800 μl 紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)(jie)液(ye)中(zhong)上下顛倒混合(he)均勻(yun)，13000rpm 離(li)心(xin) 30s，去上清(qing)，留白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)沉淀(dian)，用 50 μl 水(shui)重懸白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)沉淀(dian)（有(you)(you)少量紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)殘留并不影響 DNA 的產量，如(ru)仍然(ran)有(you)(you)大(da)量紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)未裂(lie)解(jie)(jie)，可(ke)再(zai)次用紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)(jie)液(ye)將紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)(jie)）。淋(lin)巴細(xi)(xi)(xi)胞(bao)分離(li)液(ye)分離(li)出的白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)：直接吸取(qu) 50~80 μl 白(bai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)。有(you)(you)核紅細(xi)(xi)(xi)胞(bao)抗凝(ning)全血（禽血）：吸取(qu) 10 μl 抗凝(ning)全血加(jia)入到(dao)50 μl 無菌水(shui)中(zhong)，漩渦震蕩混合(he)均勻(yun)。
（2）向上述準備好的樣品溶液中加(jia)入 100 μl gDNA LB1 和20 μl 蛋(dan)白酶 K 漩渦混合均勻 10s，56℃水(shui)浴鍋中消(xiao)化5~30min（長時間消(xiao)化可提高 DNA 的產量）。
（3）加入 700 μl gDNA BB2 漩渦震蕩混(hun)合均勻 1min，肉眼觀察有(you)(you)無未(wei)溶(rong)解(jie)的血凝塊(kuai)，如果(guo)無血凝塊(kuai)，則直(zhi)接倒入到(dao)吸附柱中，13000rpm 離心 1min。注意：如果(guo)有(you)(you)未(wei)溶(rong)解(jie)的血凝塊(kuai)，則短離心去除血凝塊(kuai)后，再(zai)倒入到(dao)吸附柱中，進行后續(xu)離心操作。
（5）倒掉(diao)廢液(ye)，向吸附(fu)柱中加入 500 μl Washing Buffer，13000rpm 離心 15s。重復此步驟一次(ci)。
（6）將吸附柱重新放(fang)回離心機，13000rpm 空離心 2min，將殘留的乙醇徹底甩干。
（7）將(jiang)吸附(fu)柱芯放入到 1.5ml 收(shou)集管中(zhong)，向吸附(fu)柱芯中(zhong)加入 60~150 μl DNA Elution Buffer（DNA Elution Buffer 預熱(re)到 65℃將(jiang)提高洗(xi)脫產量），室溫(wen)放置(zhi) 1min，13,000rpm 離心1min，洗(xi)脫液(ye)即為(wei)基因組(zu) DNA，冷凍保存。