2XRAPA HiFi PCR Mix

商品屬性：

產(chan)品(pin)名稱	規格(ge)	貨(huo)號
2XRAPA HiFi PCR Mix	1ml	BJ-PJ6586
2XRAPA HiFi PCR Mix	10ml	BJ-PJ6586

商品介紹：

描述：

  RAPA HiFi DNA 聚(ju)合酶，其來源于高保(bao)真 DNA 聚(ju)合 酶，并加(jia)入(ru)了增(zeng)強(qiang)的延(yan)伸結構，使其具(ju)有(you)超保(bao)真性(xing)(xing)能（~280 倍 Taq）、長片(pian)段擴(kuo)(kuo)增(zeng)能力(li)(li)、高產量。長片(pian)段擴(kuo)(kuo)增(zeng)能力(li)(li)，使用 該(gai)酶可輕松擴(kuo)(kuo)增(zeng) 8kb 的基(ji)因組 DNA、20kb 的λDNA、8kb 的 cDNA。該(gai)酶具(ju)有(you) 6kb/min 以上的延(yan)伸速度。該(gai) PCR Mix 具(ju)有(you) 5’-3’的聚(ju)合酶活(huo)性(xing)(xing)、強(qiang) 3’-5’的外切(qie)酶活(huo)性(xing)(xing)，產物為平末(mo) 端。

特點和用途
(1) 超保真擴增：~280 倍 Taq 的保真性能，是載體構建、點突變、NGS 模板擴增、基因合成的最佳用酶。
(2) 快速擴增：具有 6kb/min 的擴增能力。
(3) 長片段擴增：質粒、λDNA 等簡單模板可以有效擴增>20 kb，基因組可以有效擴增>8 kb，cDNA 可以有效擴增>8kb。
儲存：長期儲存置于-20°C 以下，可保存 2 年；短期使用置于 4°C（3 個月）保存。
使用方法
1. 按下表配制反應體系并混合均勻：
2×RAPA HiFi PCR Mix 12.5 μl
上游引物(10 μM) 1 μl
下游引物(10 μM) 1 μl
模板 DNA 1-250 ng
ddH2O up to 25 μl
*模板 DNA 用量參數(25 μl 反應體系)
5-250 ng Genomic DNA
 0.1-10 ng Plasmid DNA
 1-2 μl cDNA from RT reaction
2. PCR 擴增循環參數
（1）擴增片段<5kb 時采用如下程序
循環數 溫度 時間
1
st Cycle 95°C 1min
25-35 Cycles
95°C 30s
50~60°C 30s
72°C 6kb/min
Last Cycle 72°C 2min
（2）擴增片段>5kb 時采用如下程序
循環數 溫度 時間
1st Cycle 92°C 1min
25-35 Cycles
92°C 10s
50~60°C 30s
72°C 2-3kb/min
Last Cycle 72°C 2min
3. 電泳：1% 瓊脂糖凝膠電泳，上樣 5 μl，電泳結束在紫外燈下檢測條帶。
4. 注意事項：（1）當(dang)模板 GC 含量>65%時(shi)(shi)，請添加5× Q-Solution（Cat. No.: A3002）。（2）當(dang)擴增片(pian)段<1kb 時(shi)(shi)，延伸時(shi)(shi)間可直接使用 15s，當(dang)擴增片(pian)段>5kb 時(shi)(shi)，按照2-3kb/min 的延伸時(shi)(shi)間進行設置，能獲得(de)更(geng)高的產量。（3）由于不(bu)同(tong)的 PCR 管其導(dao)熱性能有所(suo)不(bu)同(tong)，通常(chang) PCR 采用25μl 體系(xi)可以獲得(de)更(geng)高的產量。