HG TaqMan miRNA反轉錄試劑盒

商品屬性(xing)：

產品名稱	規(gui)格	貨號
HG TaqMan miRNA反轉錄試劑盒	25T	BJ-PJ6638
HG TaqMan miRNA反轉錄試劑盒	100TX20μl	BJ-PJ6638

商品介紹：

描述： TaqMan miRNA 反轉(zhuan)錄(lu)試(shi)劑(ji)(ji)盒(he)采(cai)用(yong)加(jia) A 法進行(xing)反轉(zhuan)錄(lu)，加(jia) A 法的(de)反轉(zhuan)錄(lu)效率(lv)遠高(gao)于(yu)莖環法，因 此，采(cai)用(yong)該(gai)方法可極(ji)大的(de)提(ti)高(gao)檢(jian)測靈敏(min)度（原理見圖(tu) 1）。 該(gai)試(shi)劑(ji)(ji)盒(he)操作簡單，僅需要兩步即可輕松完(wan)(wan)成(cheng) miRNA 的(de) cDNA 合成(cheng)，合成(cheng)的(de) cDNA 可用(yong)于(yu)所有 miRNA 的(de)后續定(ding) 量(liang)檢(jian)測。反轉(zhuan)錄(lu)完(wan)(wan)畢后采(cai)用(yong)特異性的(de)上游引物(wu)(wu)和接(jie)頭引物(wu)(wu) 進行(xing) PCR 擴增，FAM 標記 TaqMan 探針作為熒光報告基(ji) 團進行(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測（原理見圖(tu) 1）。  TaqMan miRNA 反轉(zhuan)錄(lu)試(shi)劑(ji)(ji)盒(he)專(zhuan)用(yong)于(yu) miRNAs 分子的(de)反轉(zhuan)錄(lu)試(shi)驗，轉(zhuan)錄(lu)獲(huo)得(de)的(de) cDNA 產物(wu)(wu)用(yong)于(yu) TaqMan 定(ding)量(liang) PCR 方法檢(jian)測 miRNAs 分子

儲存：請置于-20°C，可保存 2 年；避免反復凍融
操作方法
1 按以下組分在 0.2 ml EP 管中配制應液
miRNA （5～100 ng/μl） 4 μl
5×TaqMan miRNA RT Solution A 1 μl
注意：不建議使用 Total RNA，Total RNA 試驗結果通常差
于 miRNA。
2 在 PCR 儀上按以下條件進行加 A 反應:
 37°C 30min
 85°C 5min
3 反應完畢后，在上述 5μl 反應體系中加入如下試劑，并
混合均勻。
10×TaqMan miRNA RT Primer 2 μl
10×TaqMan miRNA RT Solution B 2 μl
H2O 11 μl
4 在 PCR 儀上按以下條件進行反轉錄反應:
 30°C 5min
55°C 60min
 95°C 5min
獲得的 cDNA 產物可用于多個目標 miRNA 的檢測。反轉錄完畢后獲得的 miRNA cDNA，可加入 20~80μl ddH20 稀釋2~5 倍，通常取 2μl 即可用于 HG TaqMan miRNA 定量 PCR試劑盒檢測。