一步法miRNA反轉錄試劑盒

商(shang)品屬性(xing)：

產品名稱(cheng)	規(gui)格	貨(huo)號
一步法miRNA反轉錄試劑盒	25T	BJ-PJ6641
一步法miRNA反轉錄試劑盒	100TX20μl	BJ-PJ6641

商品介紹：

描述：由(you)于(yu) miRNAs 分(fen)子序(xu)列較小，僅 20nt 左右，沒有 真核(he)生物特(te)有的(de)(de) Poly(A)尾巴結構，采(cai)用傳統(tong) Oligo dT 引(yin) 物和(he)隨機引(yin)物很難獲(huo)得(de)(de)從 miRNA 到(dao) cDNA 的(de)(de)反(fan)轉(zhuan)錄(lu)(lu)(lu)產(chan) 物。 公(gong)司開發出一(yi)套全新的(de)(de)加 A 法(fa)(fa) miRNA 反(fan)轉(zhuan) 錄(lu)(lu)(lu)試劑盒(he)，基于(yu) Peter 改良的(de)(de) miR-Q 技術， 可(ke)以對(dui)成(cheng)熟的(de)(de) miRNA 同時完成(cheng)加 A 反(fan)應(ying)和(he)反(fan)轉(zhuan)錄(lu)(lu)(lu)反(fan)應(ying)， 直接(jie)獲(huo)得(de)(de)含有特(te)異(yi)性 tag 和(he) 15(T)的(de)(de) cDNA 產(chan)物（如圖(tu) 1 所示）。該方法(fa)(fa)使得(de)(de) miRNA 反(fan)轉(zhuan)錄(lu)(lu)(lu)與 mRNA 的(de)(de)反(fan)轉(zhuan)錄(lu)(lu)(lu)一(yi) 樣輕松。直接(jie)將提(ti)取(qu)的(de)(de) miRNA 與反(fan)應(ying)緩沖液混合物混合， 并置于(yu) PCR 儀(yi)上 1 小時即可(ke)獲(huo)得(de)(de)高濃(nong)度的(de)(de)、包(bao)含所有 miRNAs 分(fen)子的(de)(de) cDNA 產(chan)物。獲(huo)得(de)(de)的(de)(de) cDNA 產(chan)物適用于(yu) HG miRNA 熒光定(ding)量(liang) PCR 試劑盒(he)進行定(ding)量(liang)檢(jian)測，該方法(fa)(fa) 已被大(da)量(liang)文獻所采(cai)用。 

儲存：請置于-20°C，可保存 2 年；避免反復凍融
操作方法
1. 按以下組分配制反轉錄反應液
miRNA（0.01-0.1 μg）or Total RNA 0.1-2 μg
4×One step miRNA RT Solution 5 μl
*10×miRNA RT Primer 2 μl
Rnase Free H2O Up to 20 μl
*特別說明： 10×miRNA RT Primer 引物為
5’-CAGGTCCAGTTTTTTTTTTTTTTTVN-3’，定量擴增
用特異性上下游引物進行擴增，圖 2 是以 hsa-miR-21 為
實例說明特異性上下游引物的設計方法
2. 在 PCR 儀上按以下條件進行反應:
 37°C 60min
 95°C 5min
3. 獲得(de) cDNA 產物后使用 HG miRNA 熒光定量 PCR 試劑盒進行 miRNA 定量檢測(ce)。