PBCV DNA連接酶

商品屬性：

產品名稱	規格	貨號
PBCV DNA連接酶	1250U	BJ-PJ6650
PBCV DNA連接酶	5KU	BJ-PJ6650

商(shang)品介紹(shao)：

描述： PBCV DNA 連(lian)(lian)(lian) 接(jie)酶(mei) 也稱為 SplintR 連(lian)(lian)(lian)接(jie)酶(mei) 或 Chorella 病毒 DNA 連(lian)(lian)(lian)接(jie)酶(mei)，它(ta)能夠高效催(cui)化相鄰的(de) DNA 核苷酸(suan)的(de)連(lian)(lian)(lian)接(jie)，這個連(lian)(lian)(lian)接(jie)過程需要一條互補的(de) RNA 在(zai)兩條 DNA 單鏈間起“夾板”或“橋(qiao)梁”的(de)固定作(zuo)用。PBCV DNA 連(lian)(lian)(lian)接(jie) 酶(mei)的(de)這種活性(xing)遠遠優于(yu)(yu)傳統的(de) T4 DNA 連(lian)(lian)(lian)接(jie)酶(mei)，有(you)助(zhu)于(yu)(yu) miRNAs 和 mRNAs，包括(kuo) SNPs 在(zai)內(nei)的(de)研究方法的(de)創(chuang)新。 另外，在(zai)二(er)代測序和分子診斷等眾(zhong)多領(ling)域中，PBCV DNA 連(lian)(lian)(lian)接(jie)酶(mei)是富集目的(de)基因(yin)的(de)理想選擇。它(ta)具有(you)穩定的(de)生物活 性(xing)，對 RNA 介導固定的(de) DNA 底(di)物親(qin)和性(xing)強(qiang)（米氏常數 Km = 1 nM），能夠在(zai)復雜的(de)混(hun)合物中檢測到(dao)亞納摩爾級的(de)特 定 RNA。因(yin)此(ci)，在(zai) RNA 檢測技(ji)術中，PBCV DNA 連(lian)(lian)(lian)接(jie)酶(mei) 不失為最佳選擇用酶(mei)。

儲存：-20℃可保存 2 年。
10×PBCV Ligase Buffer：500 mM Tris-HCl, pH 7.5, 50 mM
MgCl2, 25 mM DTT, 5 mM ATP.
活性定義：25°C 反應 30 分鐘條件下，使 1pmol 的
DNA:RNA 雜交底物連接所需要的酶量定義為 1Unit。
反應溫度及失活該酶的最佳反應溫度為 25°C，可在 16-37°C 之間優化，37℃可明顯提高反應的特異性；該酶在 65°C 加熱 20min 即可失活。
使用方法
1. 連接反應
連接底物（1 μM） 2 μl
10×PBCV Ligase Buffer 2 μl
PBCV DNA Ligase(25 U/μl) 1 μl
 滅菌水 up to 20 μl
25°C 反應 15-60min。
2. 65°C 加熱 20min，使酶失活。
注意事項
1.該酶對一價陽離子非常敏感，如 NaCl 或 KCl 的濃度應低于 50 mM。
2. 該酶的反應溫度為16~37°C，最佳溫度為25℃。
3. 連接(jie)效率隨著夾板 RNA 長度的減少(shao)而降低，當(dang)長度小(xiao)于等于 10nt 時(shi)，連接(jie)效率為(wei)零。