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Benzonase 核酸酶商品(pin)屬性(xing):
產品名稱
規(gui)格
貨號
Benzonase 核酸酶
25KU
BJ-PJ6660
Benzonase 核酸酶
10000ku
BJ-PJ6660
商品介(jie)紹:描述:
Benzonase 核(he)(he)酸(suan)酶是來自(zi) Serratia marcescens, 經基因工程改進的(de)(de)(de)核(he)(he)酸(suan)內切酶。它能降解(jie)所有形式(包(bao)括單鏈,雙鏈,線性(xing)和(he)(he)環狀(zhuang))的(de)(de)(de) DNA 和(he)(he) RNA 而沒有蛋白裂解(jie)活性(xing),在廣泛(fan)條件范圍具有很高的(de)(de)(de)特異性(xing)。它將核(he)(he)酸(suan)完全(quan)消化成3-5 堿基長度(du)(du)(雜交(jiao)限(xian)度(du)(du)以(yi)下)的(de)(de)(de) 5’-單磷酸(suan)寡核(he)(he)苷(gan)酸(suan),最適合從(cong)重級蛋白中去除(chu)核(he)(he)酸(suan)的(de)(de)(de)操(cao)作,符合 FDA 關于核(he)(he)酸(suan)污染的(de)(de)(de)處(chu)理規程。Benzonase 核(he)(he)酸(suan)酶迅速(su)水解(jie)核(he)(he)酸(suan)的(de)(de)(de)能力使(shi)該酶成為降低(di)粘(zhan)度(du)(du)以(yi)減少處(chu)理時間(jian)和(he)(he)增加蛋白產量的(de)(de)(de)最佳選擇。該酶與BacReady-Protein Extraction Solution和(he)(he)RIPA LysisBuffer 等(deng)蛋白抽提試劑配合使(shi)用,從(cong)而消除(chu)粗提物中的(de)(de)(de)核(he)(he)酸(suan),降低(di)粘(zhan)度(du)(du)。
單位定義:在 30 分鐘內使△A260 值降低 1.0(相當于完全消化 37 μg DNA )的酶量定義為一個活性單位。
應用
蛋白提取時去除核酸污染
2D 凝膠電泳
Western Blot
IP- Western
儲存:置于-20°C 保存。
操作方法
1. 組織處理方法:將 30-50mg 動植物組織研磨充分后,加入 100-200 μl RIPA 裂解液,同時加入 1 μlBenzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。
2.細胞處理方法:將 106-107懸浮細胞液 6,000 rpm 離心10min 后,棄掉上清液,使用 100 μl RIPA 裂解液重懸細胞,同時加入 1μl Benzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。注意:貼壁細胞重懸于 PBS 后,處理方法同懸浮細胞。
3. 大腸桿菌細胞處理:將 500 μl E.coli 培養液 8,000rpm 離心 5min 后,棄掉上清液,使用 100 μl 大腸桿菌裂解液重懸細胞,同時加入 1μl Benzonase 核酸酶,旋渦振蕩混合均勻,室溫孵育 30min。
4. 裂解步驟完成后,將裂解產物于 13,000 rpm 離心 10min后,取上清即為提取蛋白(包涵體蛋白留取沉淀為提取蛋白)。
5. 提取完(wan)蛋(dan)白后(hou)可(ke)利用 BCA 蛋(dan)白定量試劑盒測(ce)定蛋(dan)白濃度。
