牛痘病毒-拓撲異構酶

商品(pin)屬(shu)性(xing)：

產品(pin)名(ming)稱(cheng)	規格	貨號(hao)
牛痘病毒-拓撲異構酶	500U	BJ-PJ6718
牛痘病毒-拓撲異構酶	5KU	BJ-PJ6718

商品介紹(shao)：

描述：

該 Topoisomerase I 來源于牛痘病毒（vaccinia virus），通過基因重組方案制備純化。其能解旋DNA的超螺旋結構，除此外其能識別并切割雙鏈 DNA 末端 [5’C(T)CCTT↓]，并且與 DNA 形成共價連接形成穩定復合物。該共價復合物遇
到DNA 的5’-OH基團后，重新連接形成完整 DNA 鏈。因此，使用該酶可作為 DNA 連接的有效工具，可用于 DNA 的載體連接（TOPO 克隆載體制備）、接頭連接（NGS 建庫）等實驗。

應用
DNA-載體連接
接頭連接
儲存：-20°C 可保存 3 年。
TOPO 酶保存液：20mM Tris-HCl，pH7.8，150mM NaCl，
0.1% Tween20，50%甘油。
反應實例 1（質粒解旋）
10×TOPO Buffer 2.5 μl
超螺旋質粒 DNA 1-20 μg
Vaccinia TOPO (5pmol/μl) 1 μl
ddH2O Up to 25 ul
37°C 孵育 5-15min。

注意：

（1）雙鏈接頭 A 通常 5’做 NH2 封閉修飾，以防止自連接；接頭 A 的 CCCTT 后通常包含 5-12bp 尾巴，再長的尾巴會導致連接效率大幅下降；
（2）雙鏈接頭 B 的 5’端必須包含-OH。
（3）由于該酶應(ying)用(yong)廣泛(fan)，在不(bu)同的實驗中使用(yong)策略(lve)不(bu)同，需要靈活(huo)運用(yong)。