單克隆抗體和多克隆抗體性質上的區別

   抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)是指機體(ti)(ti)(ti)受抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)刺激后，由(you)淋巴系(xi)統的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(主(zhu)要是B淋巴細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)分化后的(de)(de)漿(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao))產(chan)生(sheng)具有特異(yi)性免疫功能球(qiu)蛋白(bai)。抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)物(wu)質(zhi)(zhi)上能刺激B淋巴細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)結(jie)構部位(wei)叫做(zuo)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)簇，一(yi)個抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)具備多(duo)個抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)簇，只針對一(yi)個抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)簇起作(zuo)用(yong)的(de)(de)漿(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)群就是一(yi)個純系(xi)，即一(yi)種(zhong)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)，由(you)一(yi)種(zhong)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)產(chan)生(sheng)的(de)(de)特異(yi)性抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)叫做(zuo)單(dan)(dan)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)。機體(ti)(ti)(ti)受到抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)的(de)(de)刺激往往會針對抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)的(de)(de)多(duo)個抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)簇相(xiang)應的(de)(de)產(chan)生(sheng)多(duo)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)，多(duo)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)能與抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)的(de)(de)多(duo)處(chu)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)簇結(jie)合。由(you)一(yi)種(zhong)漿(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)產(chan)生(sheng)的(de)(de)特異(yi)性結(jie)合抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)單(dan)(dan)一(yi)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)決(jue)定(ding)簇的(de)(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)即為單(dan)(dan)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)。多(duo)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)可以看作(zuo)是多(duo)種(zhong)單(dan)(dan)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)的(de)(de)混(hun)合物(wu)。單(dan)(dan)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)和多(duo)克(ke)(ke)隆(long)(long)(long)抗(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)(kang)體(ti)(ti)(ti)性質(zhi)(zhi)上的(de)(de)區(qu)別：

1、特異性
多(duo)(duo)克隆(long)抗(kang)體猶(you)如許多(duo)(duo)單克隆(long)抗(kang)體的(de)集合(he)(he)，它們有(you)的(de)特異(yi)(yi)性高(gao)，有(you)的(de)特異(yi)(yi)性低，總(zong)(zong)體特異(yi)(yi)性符(fu)合(he)(he)正態分(fen)布曲(qu)(qu)線(xian)的(de)形式，而其特異(yi)(yi)性的(de)總(zong)(zong)體表現也應處于統計(ji)學正態曲(qu)(qu)線(xian)中位(wei)線(xian)（MID）的(de)水(shui)平。而單抗(kang)制備(bei)后(hou)續的(de)篩選過程，可去除大部分(fen)的(de)非(fei)特異(yi)(yi)抗(kang)體，保留幾株特異(yi)(yi)性較好的(de)單克隆(long)抗(kang)體。

一般而言(yan)，單克隆抗體的(de)確具有更高的(de)特(te)異(yi)性。

多抗(kang)特異(yi)性可(ke)通過(guo)生產(chan)環(huan)節比如使用高純(chun)(chun)度的免(mian)疫(yi)原(yuan)，以(yi)(yi)及使用提(ti)純(chun)(chun)的靶(ba)點蛋白對多抗(kang)進(jin)行免(mian)疫(yi)親和(he)層析純(chun)(chun)化等方法得以(yi)(yi)改進(jin)。經過(guo)免(mian)疫(yi)親和(he)層析的多抗(kang)其總體特異(yi)性將大大提(ti)升，與單抗(kang)相比已相差無幾。

2、關于假陽性
根據(ju)抗(kang)體(ti)最核(he)心的(de)(de)(de)表位(wei)結合(he)區(qu)域—互補決定區(qu)（Complementarity Determining Region，CDR）的(de)(de)(de)結構，抗(kang)體(ti)通常可以緊密結合(he)的(de)(de)(de)抗(kang)原(yuan)(yuan)表面區(qu)域或(huo)表位(wei)面積很小，對于(yu)變性的(de)(de)(de)肽段(duan)約在4-8個Aa以內，以及5-7個單(dan)糖的(de)(de)(de)糖鏈或(huo)6-8個核(he)苷(gan)酸(suan)的(de)(de)(de)核(he)酸(suan)。通過肽段(duan)BLAST可以得知，小肽段(duan)序(xu)列完全相同(tong)的(de)(de)(de)情(qing)況將在很多不同(tong)蛋白上發生。這意味(wei)著(zhu)單(dan)抗(kang)識別的(de)(de)(de)這個表位(wei)可能并(bing)不僅僅屬于(yu)靶(ba)標蛋白本身，也(ye)即(ji)意味(wei)著(zhu)，即(ji)使(shi)利用純化抗(kang)原(yuan)(yuan)蛋白進行了特異(yi)性篩選(xuan)的(de)(de)(de)單(dan)克隆(long)抗(kang)體(ti)，當用其檢測復雜樣本時，也(ye)將面臨交叉反應(ying)或(huo)假陽性問(wen)題。

3、靈敏度
特異性(xing)(xing)決(jue)定(ding)(ding)(ding)了假陽(yang)(yang)性(xing)(xing)結(jie)(jie)(jie)果(guo)的多(duo)少，敏(min)感性(xing)(xing)決(jue)定(ding)(ding)(ding)了檢出率的高低(di)。在復(fu)(fu)雜樣本(ben)中(zhong)，由于(yu)多(duo)克隆抗(kang)體識別抗(kang)原(yuan)(yuan)的多(duo)個表(biao)(biao)位(wei)(wei)，可以在一(yi)(yi)個抗(kang)原(yuan)(yuan)分子上結(jie)(jie)(jie)合更多(duo)的抗(kang)體分子，也(ye)可以在當部分抗(kang)原(yuan)(yuan)表(biao)(biao)位(wei)(wei)受(shou)到一(yi)(yi)定(ding)(ding)(ding)程度(du)的遮蓋或破(po)壞時，仍有抗(kang)體結(jie)(jie)(jie)合在未受(shou)影(ying)響的表(biao)(biao)位(wei)(wei)上。這種情況常發生在如石蠟(la)包(bao)埋的免(mian)疫(yi)組化（IHC-P）等實驗中(zhong)，當樣本(ben)經甲(jia)醛交聯(lian)固定(ding)(ding)(ding)后(hou)，即使經過(guo)抗(kang)原(yuan)(yuan)修復(fu)(fu)，抗(kang)原(yuan)(yuan)表(biao)(biao)位(wei)(wei)也(ye)不(bu)可避免(mian)地受(shou)到了影(ying)響，此(ci)時單克隆抗(kang)體由于(yu)只(zhi)識別一(yi)(yi)個表(biao)(biao)位(wei)(wei)，結(jie)(jie)(jie)合能力可能大大降低(di)甚至(zhi)呈現(xian)陰性(xing)(xing)結(jie)(jie)(jie)果(guo)，而只(zhi)要不(bu)是(shi)所有表(biao)(biao)位(wei)(wei)都受(shou)到了破(po)壞，多(duo)抗(kang)仍可以獲得該靶(ba)點的陽(yang)(yang)性(xing)(xing)結(jie)(jie)(jie)果(guo)。同樣的，對于(yu)樣本(ben)中(zhong)一(yi)(yi)些(xie)表(biao)(biao)達(da)豐度(du)極低(di)的蛋(dan)白，由于(yu)多(duo)表(biao)(biao)位(wei)(wei)結(jie)(jie)(jie)合更多(duo)抗(kang)體分子，檢測信號就將被(bei)放大。因此(ci)，使用多(duo)抗(kang)具有靈敏(min)度(du)和(he)檢出率上的優(you)勢。