原代細胞和傳代細胞培養四方面區別
原代細胞和傳代細胞培養四方面區別:
區別一:定義不(bu)同(tong)
原代細胞培(pei)養(yang):原代培(pei)養(yang)是指由體內取出組織或細胞進行的首次培(pei)養(yang),也(ye)叫初代培(pei)養(yang)。
傳代(dai)細胞培(pei)養(yang):傳代(dai)培(pei)養(yang)是(shi)指需要將培(pei)養(yang)物分割(ge)成(cheng)小的(de)部分,重新接種到另外的(de)培(pei)養(yang)器(qi)皿(瓶)內,再(zai)進行培(pei)養(yang)的(de)過程。對(dui)單層培(pei)養(yang)而言,80%匯(hui)合(he)或剛匯(hui)合(he)的(de)細胞是(shi)較理想(xiang)的(de)傳代(dai)階段(duan)。
區別二:特點不同
原代細胞(bao)培(pei)養(yang):與體(ti)內原組織在形態結構和功能活動上(shang)相(xiang)似性大。由(you)于(yu)培(pei)養(yang)的(de)(de)細胞(bao)剛剛從活體(ti)組織分離出來,故更(geng)接近于(yu)生物(wu)(wu)體(ti)內的(de)(de)生活狀態。這一方(fang)法可(ke)為研究生物(wu)(wu)體(ti)細胞(bao)的(de)(de)生長、代謝、繁殖提供(gong)有力的(de)(de)手(shou)段。同時也為以后傳(chuan)代培(pei)養(yang)創造條(tiao)件。
傳代(dai)細(xi)胞培養(yang)(yang)(yang):當原代(dai)培養(yang)(yang)(yang)成功以后,隨(sui)著培養(yang)(yang)(yang)時間(jian)的延長(chang)和(he)細(xi)胞不斷(duan)分(fen)裂,一則細(xi)胞之間(jian)相互接(jie)觸而發生接(jie)觸性抑制(zhi),生長(chang)速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養(yang)(yang)(yang)物(wu)不足和(he)代(dai)謝物(wu)積(ji)累而不利于生長(chang)或發生中(zhong)毒。
區別三:生存率不同
原代細胞(bao)培養:過程相對復(fu)雜,培養條件要求也更高。
傳代(dai)細胞培(pei)養:一般(ban)普(pu)通培(pei)養條件下都容(rong)易生(sheng)存(cun),傳代(dai)細胞容(rong)易增殖。
區別四:原理不同
原代(dai)細胞培養(yang):將動物機體(ti)的各(ge)種組織(zhi)從機體(ti)中取出,經各(ge)種酶(常(chang)(chang)用胰蛋白酶)、螯合(he)劑(常(chang)(chang)用EDTA)或機械方法處理,分(fen)散成單細胞,置合(he)適的培養(yang)基中培養(yang),使細胞得以(yi)生(sheng)存、生(sheng)長和(he)繁(fan)殖,這(zhe)一過程稱原代(dai)培養(yang)。
傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)細胞培(pei)(pei)養(yang):當細胞在(zai)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)中長滿(man)后就需(xu)(xu)(xu)要(yao)將其稀釋(shi)分(fen)種(zhong)成多瓶(ping),細胞才能繼續(xu)生長。這一過(guo)程(cheng)就叫(jiao)傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)。傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)可獲得(de)大量細胞供實驗所(suo)需(xu)(xu)(xu)。傳(chuan)(chuan)代(dai)(dai)要(yao)在(zai)嚴格的無菌(jun)(jun)條件下進行,每一步都需(xu)(xu)(xu)要(yao)認真仔細的無菌(jun)(jun)操作。