檢測實驗室生化試劑盒適合實驗使用攻略小結

  通常(chang)生(sheng)(sheng)化(hua)試(shi)劑(ji)(ji)盒可(ke)分(fen)為液體(ti)單試(shi)劑(ji)(ji)和液體(ti)雙(shuang)試(shi)劑(ji)(ji)，前者特(te)別適用于半自動生(sheng)(sheng)化(hua)分(fen)析(xi)儀(yi)和小型自動生(sheng)(sheng)化(hua)分(fen)析(xi)儀(yi)，使(shi)用方便(bian)，缺點(dian)是穩(wen)定性(xing)較差。與單試(shi)劑(ji)(ji)相(xiang)比(bi)，雙(shuang)試(shi)劑(ji)(ji)提(ti)高了(le)抗干(gan)擾能(neng)力，具有穩(wen)定性(xing)能(neng)較好，可(ke)消除樣品自身空(kong)白等特(te)點(dian)。此外還有多項(xiang)同測(ce)組(zu)合試(shi)劑(ji)(ji)、濃(nong)縮試(shi)劑(ji)(ji)等。

對(dui)新的試(shi)劑(ji)盒，我們首先要查看(kan)其(qi)資質是(shi)否齊全(quan)，是(shi)否為合法有效試(shi)劑(ji)，是(shi)否有相(xiang)關(guan)的臨(lin)床(chuang)試(shi)驗(yan)(yan)驗(yan)(yan)證(zheng)等。其(qi)次，在本實驗(yan)(yan)室，可做(zuo)以(yi)下工作來進行驗(yan)(yan)證(zheng)是(shi)否適合使用。

一、試劑空白吸光度

用(yong)蒸餾水做(zuo)空(kong)白(bai)(bai)，用(yong)zhi 定(ding)(ding)的空(kong)白(bai)(bai)液(ye)加入(ru)試劑(ji)作為樣(yang)品測(ce)試，在測(ce)試主波長下，記錄測(ce)試啟(qi)動時的吸光度(du)(du)(du)(A1)和約(yue)5分鐘后(hou)的吸光度(du)(du)(du)(A2)，A2測(ce)試結果即為試劑(ji)空(kong)白(bai)(bai)吸光度(du)(du)(du)測(ce)定(ding)(ding)值，應符合生(sheng)產企業(ye)給定(ding)(ding)范圍。這是判定(ding)(ding)試劑(ji)質量的一個有效指標。

二、試劑空白變化速率

對于速(su)率(lv)法(fa)試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒(he)，用zhi 定(ding)(ding)(ding)的(de)空(kong)(kong)白液加入試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)作為樣品測試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)時，在測試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)主(zhu)(zhu)波長下，記錄測試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)啟動(dong)時的(de)吸(xi)(xi)光(guang)(guang)度(du)(A1)和約(yue)5分鐘(T)后的(de)吸(xi)(xi)光(guang)(guang)度(du)(A2)，計算試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)空(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)度(du)變(bian)(bian)化(hua)率(lv)(DA/min)，應不(bu)超過生(sheng)產企(qi)業給定(ding)(ding)(ding)值。測定(ding)(ding)(ding)試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)空(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)度(du)變(bian)(bian)化(hua)(ΔA/min)，用來(lai)檢查(cha)試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)在工作狀態下的(de)穩定(ding)(ding)(ding)性。但事實(shi)上，試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)空(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)度(du)變(bian)(bian)化(hua)速(su)率(lv)無(wu)法(fa)反映(ying)(ying)試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)盒(he)的(de)穩定(ding)(ding)(ding)性，試(shi)(shi)(shi)(shi)(shi)劑(ji)(ji)空(kong)(kong)白吸(xi)(xi)光(guang)(guang)度(du)變(bian)(bian)化(hua)速(su)率(lv)主(zhu)(zhu)要反映(ying)(ying)干擾程度(du)和儀器的(de)穩定(ding)(ding)(ding)性。

三、分析靈敏度

用吸光(guang)度差值(ΔA)或吸光(guang)度變(bian)化(hua)(ΔA/min)來(lai)表示單位(wei)濃度的(de)被測(ce)物反應所引起(qi)的(de)信(xin)號變(bian)化(hua)，其含義類(lei)似摩(mo)爾消(xiao)光(guang)系數，應符合(he)生(sheng)產企業給定范(fan)圍。需要注意的(de)是，分析靈敏(min)度不(bu)是越高越好，以適合(he)待測(ce)物檢測(ce)范(fan)圍為原(yuan)則。分析靈敏(min)度一般用于批(pi)間(jian)比(bi)較(jiao)，較(jiao)能反映(ying)制造商的(de)配方(fang)、原(yuan)料的(de)一致(zhi)性(xing)。

四、線性范圍

取高(gao)濃度(du)樣(yang)品和低濃度(du)樣(yang)品按不(bu)同比例(li)混合(he)成5個濃度(du)做線(xian)性(xing)(xing)試(shi)驗。線(xian)性(xing)(xing)范圍內的(de)分析性(xing)(xing)能(neng)應符合(he)如下要求：

①線性(xing)性(xing)相關系數r應(ying)≥0.990;

②線性(xing)(xing)偏差應不超過生產企業給定值。試劑(盒)的線性(xing)(xing)范圍越(yue)寬，臨床復(fu)測幾(ji)率越(yue)小，但(dan)與樣品/試劑比(bi)例(li)成反比(bi)。

五、重復性

1. 批內重(zhong)復(fu)性(xing) 在(zai)重(zhong)復(fu)性(xing)條(tiao)件下(xia)，用高、中、低三個水(shui)平濃(nong)度(高、低濃(nong)度應超過參考區(qu)間20%～30%，中濃(nong)度水(shui)平在(zai)參考區(qu)間之內)的(de)控制(zhi)血(xue)清(qing)(qing)或新鮮人血(xue)清(qing)(qing)測(ce)試試劑，重(zhong)復(fu)測(ce)試至少(shao)10次(ci)。

2. 批(pi)間重復性(xing) 用(yong)質量控制血(xue)清測(ce)(ce)(ce)試(shi)3×3(3個批(pi)號(hao)，每個批(pi)號(hao)取3瓶)批(pi)間差(cha)，較能反(fan)映制造商的(de)(de)配方、原料的(de)(de)一(yi)致(zhi)性(xing)。干粉或凍干試(shi)劑還(huan)需測(ce)(ce)(ce)定(ding)(ding)批(pi)內(nei)瓶間差(cha)，測(ce)(ce)(ce)定(ding)(ding)同(tong)一(yi)批(pi)號(hao)的(de)(de)試(shi)劑20瓶，用(yong)變(bian)異系數(CV)來表示。變(bian)異系數(CV)不超(chao)過生產企(qi)業給定(ding)(ding)值(zhi)。

六、準確度

1. 相對(dui)偏(pian)差(cha) 直接用(yong)試劑(ji)盒測(ce)定(ding)參(can)考(kao)物質(平行3次)，評價測(ce)定(ding)均(jun)值(zhi)與靶值(zhi)的偏(pian)離程度(du)。也可用(yong)由參(can)考(kao)方法定(ding)值(zhi)的高、中、低三個濃(nong)度(du)的人混合血清，用(yong)試劑(ji)盒平行測(ce)定(ding)3次，計(ji)算均(jun)值(zhi)與定(ding)值(zhi)的相對(dui)偏(pian)差(cha)。

2. 比對試驗(yan) 既無參考(kao)物質、參考(kao)血(xue)清(qing)，也無標準品，也可用(yong)比對試驗(yan)來驗(yan)證(zheng)準確度。

七、校準品溯源、質控品賦值

1. 校準品溯源性 根據GB/T21415及(ji)有關規定提供校準品的(de)來(lai)源、賦值過程及(ji)測(ce)量不確(que)定度等內容，明確(que)溯源途徑。

2. 質(zhi)控品(pin)賦值有效性 質(zhi)控品(pin)的測定(ding)結果應在試劑盒規定(ding)的范圍(wei)內。

八、穩定性

1. 效期穩定(ding)性 取(qu)已到效期的(de)試劑盒按以上評(ping)價方(fang)法對試劑盒性能指標進(jin)行評(ping)價。

2. 熱(re)穩(wen)(wen)定(ding)性試驗 生(sheng)化(hua)試劑盒(he)(he)一般置2-8℃保存，為了(le)快速有效地(di)評價試劑盒(he)(he)的穩(wen)(wen)定(ding)性，可以(yi)用(yong)加速試驗來(lai)估計。

3. 開瓶穩定性 干粉試劑開瓶后(復(fu)溶后)在規定的儲存條件下保存至預期時(shi)間內，產品的性能至少應(ying)符合(he)線性和準確度的要(yao)求。