確保細胞活躍的方法小結

        細胞，生(sheng)物(wu)(wu)(wu)學名(ming)詞(ci)，生(sheng)物(wu)(wu)(wu)體(ti)(ti)(ti)的(de)結(jie)構(gou)(gou)(gou)和功能的(de)基本單位。一般(ban)具有(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)核(he)、細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)質和細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜(mo)。植(zhi)物(wu)(wu)(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)膜(mo)外(wai)還有(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)壁(bi)(bi)。體(ti)(ti)(ti)形極微(wei)，在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)始能窺見。形狀多種多樣，主(zhu)要由細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)核(he)與細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)質構(gou)(gou)(gou)成(cheng)，表面有(you)薄膜(mo)。動植(zhi)物(wu)(wu)(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)結(jie)構(gou)(gou)(gou)大致(zhi)相同。植(zhi)物(wu)(wu)(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)質膜(mo)外(wai)有(you)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)壁(bi)(bi)，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)壁(bi)(bi)中(zhong)常有(you)質體(ti)(ti)(ti)，動物(wu)(wu)(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)質中(zhong)常有(you)中(zhong)心體(ti)(ti)(ti)，而高等(deng)植(zhi)物(wu)(wu)(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)中(zhong)則無。細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)有(you)運動、營(ying)養和繁殖(zhi)等(deng)機能。細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)是許多生(sheng)物(wu)(wu)(wu)學實驗的(de)主(zhu)角。如果(guo)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)心情不(bu)好，那么實驗的(de)結(jie)果(guo)也不(bu)會好到哪(na)兒去(qu)。下(xia)面確保(bao)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)活躍的(de)方法小結(jie)仔細(xi)(xi)(xi)(xi)了解一下(xia)：

1. 確保所有實驗室材料都無菌

交叉(cha)污(wu)(wu)染(ran)是細胞(bao)培養的大(da)敵。即使是最輕微的污(wu)(wu)染(ran)，也可(ke)能(neng)毀了幾個星(xing)期的成(cheng)果。因(yin)培養箱(xiang)內溫暖(nuan)潮濕(shi)，真(zhen)菌極易生長，因(yin)此必(bi)須(xu)注意定(ding)期清潔。此外，在(zai)將(jiang)培養瓶、移液管及其他的相關物品放入超凈臺之前(qian)，應用酒精擦拭干凈，以避(bi)免污(wu)(wu)染(ran)。

2. 在使用前正確解凍細胞

盡(jin)管解凍(dong)看起來是個簡(jian)單的步驟(zou)，但必須操作得(de)當(dang)，以(yi)(yi)免(mian)傷害細胞(bao)。長時間暴露在高(gao)溫(wen)條件下會使細胞(bao)無法鋪板。因此，凍(dong)存管應當(dang)在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培養基稀釋，以(yi)(yi)避(bi)免(mian)DMSO造成直接傷害。

3. 小心處理您的培養物

細胞(bao)(bao)培(pei)養的(de)(de)脆弱(ruo)性怎么強(qiang)調(diao)也不為過。劇烈搖(yao)晃，或(huo)連續的(de)(de)溫度波動可能(neng)會對生(sheng)長產生(sheng)不利的(de)(de)影響。確保培(pei)養箱是水(shui)平的(de)(de)，溫度均一，且遠(yuan)離(li)電動儀器。此外，盡量避免一次處(chu)理多個細胞(bao)(bao)系，因為它(ta)可能(neng)會影響細胞(bao)(bao)的(de)(de)基因型(xing)和表型(xing)。您還應定期完成STR圖(tu)譜(pu)分析，以確認細胞(bao)(bao)系的(de)(de)身份。

4. 使用對數生長期的細胞

細(xi)胞(bao)培養過程共有3個階段(duan)：停(ting)滯期、對數(shu)期和平臺期，分別代表了低細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)、高細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)和無細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)。最(zui)有活力的細(xi)胞(bao)是(shi)健康的，快(kuai)速分裂的，在對數(shu)期以70-80%的匯合度存在。

5. 在傳代之前不要讓細胞*匯合

匯合(he)度是(shi)指貼壁細胞占(zhan)據培養(yang)瓶表(biao)面積的比例。*匯合(he)意(yi)(yi)味著100%的表(biao)面都被貼壁細胞覆(fu)蓋(gai)。一(yi)定要避(bi)免這種狀態，因(yin)為它意(yi)(yi)味著細胞不(bu)能繼續生長。不(bu)過，當務之急是(shi)使用活躍生長的細胞。

6. 選擇最佳的培養基開發策略

在(zai)細胞培養(yang)(yang)過程(cheng)中，培養(yang)(yang)基(ji)是控制產(chan)品質量、產(chan)量和成本的最重要因(yin)素。必須針(zhen)對每(mei)種培養(yang)(yang)物來定(ding)制培養(yang)(yang)基(ji)，以優化實驗結(jie)果(guo)。在(zai)決定(ding)以哪種方式來開發您(nin)(nin)的培養(yang)(yang)基(ji)時，您(nin)(nin)有幾(ji)個選擇。您(nin)(nin)可以購買現成的，自(zi)己開發，也(ye)可以與另(ling)一家公司(si)合作開發特定(ding)的培養(yang)(yang)基(ji)。在(zai)這個過程(cheng)中，您(nin)(nin)需(xu)要考慮時間和成本等(deng)因(yin)素。