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ELISA試劑盒實驗液體類標本收集處理
ELISA試(shi)劑盒實驗,在收(shou)(shou)集樣本前(qian)都必須有(you)一個完整的計劃,必須清(qing)楚要檢(jian)測的成份是否足(zu)夠穩定。對(dui)收(shou)(shou)集后當天就進(jin)行檢(jian)測的樣本,及(ji)時儲存(cun)在4℃備(bei)用。對(dui)于隔天再檢(jian)測的樣本,及(ji)時分裝后凍(dong)存(cun)在-20℃備(bei)用,有(you)條(tiao)件的,最好-70℃凍(dong)存(cun)備(bei)用。標本應(ying)避免反復凍(dong)融。
液體類標本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。實驗液體類標本收集處理如下:
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
2. 血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4. 細胞培養上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
5. 培養細胞
檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
6. 組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
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