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天然培養基血清主要作用及缺點

     天然培養基是指來自動物體液(ye)或利用(yong)組(zu)織(zhi)(zhi)分離提(ti)取的(de)一類培(pei)(pei)養基(ji),如血(xue)漿、血(xue)清(qing)、淋巴液(ye)、雞胚浸出液(ye)等。組(zu)織(zhi)(zhi)培(pei)(pei)養技術建立早期,體外培(pei)(pei)養細胞(bao)(bao)都是利用(yong)天(tian)然(ran)培(pei)(pei)養基(ji)。但是由于天(tian)然(ran)培(pei)(pei)養基(ji)制作過程復雜、批間差異大,因此(ci)逐漸(jian)為合成培(pei)(pei)養基(ji)所替代。廣泛使用(yong)的(de)天(tian)然(ran)培(pei)(pei)養基(ji)是血(xue)清(qing),另外各種組(zu)織(zhi)(zhi)提(ti)取液(ye)、促進細胞(bao)(bao)貼壁(bi)的(de)膠原類物質在培(pei)(pei)養某些特殊細胞(bao)(bao)也是必(bi)不可少。

一、血清主要作用:

提供基(ji)本(ben)營(ying)養物(wu)質(zhi):氨(an)基(ji)酸、維生(sheng)素、無機物(wu)、脂類物(wu)質(zhi)、核酸衍(yan)生(sheng)物(wu)等,是(shi)細(xi)胞生(sheng)長必須的(de)物(wu)質(zhi)。

提供(gong)激素和各種生(sheng)長因子(zi):胰島(dao)素、腎上腺皮質激素(氫化可(ke)的松(song)(song)、地塞米松(song)(song))、類固(gu)醇激素(雌二(er)醇、睪酮、孕(yun)酮)等(deng)。生(sheng)長因子(zi)如成纖維細(xi)胞生(sheng)長因子(zi)、表皮生(sheng)長因子(zi)、血小板(ban)生(sheng)長因子(zi)等(deng)。

提供結(jie)合蛋白(bai)(bai):結(jie)合蛋白(bai)(bai)作用(yong)是攜帶(dai)重(zhong)要地低分子量(liang)物(wu)質,如白(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)攜帶(dai)維(wei)生素、脂肪、以(yi)及激素等,轉鐵蛋白(bai)(bai)攜帶(dai)鐵。結(jie)合蛋白(bai)(bai)在細胞代謝過程中起重(zhong)要作用(yong)。

提(ti)供促(cu)接觸(chu)和(he)伸展因子(zi)使細胞貼壁免受(shou)機械損傷。

對培(pei)養(yang)中(zhong)(zhong)的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)起到(dao)某些(xie)保護作用(yong):有(you)(you)一些(xie)細(xi)(xi)胞(bao),如內皮細(xi)(xi)胞(bao)、骨(gu)髓樣細(xi)(xi)胞(bao)可(ke)以釋放蛋(dan)白酶(mei),血(xue)(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)含(han)(han)有(you)(you)抗蛋(dan)白酶(mei)成分,起到(dao)中(zhong)(zhong)和作用(yong)。這(zhe)種作用(yong)是偶然發(fa)現(xian)的(de)(de),現(xian)在(zai)則有(you)(you)目(mu)的(de)(de)的(de)(de)使用(yong)血(xue)(xue)清(qing)來終(zhong)止胰蛋(dan)白酶(mei)的(de)(de)消化作用(yong)。因為胰蛋(dan)白酶(mei)已經(jing)被(bei)廣(guang)泛用(yong)于貼壁細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)消化傳代(dai)。血(xue)(xue)清(qing)蛋(dan)白形成了(le)血(xue)(xue)清(qing)的(de)(de)粘度,可(ke)以保護細(xi)(xi)胞(bao)免受(shou)機械損傷,特別是在(zai)懸浮(fu)培(pei)養(yang)攪拌時,粘度起到(dao)重要(yao)作用(yong)。血(xue)(xue)清(qing)還(huan)含(han)(han)有(you)(you)一些(xie)微量元素和離子,他們在(zai)代(dai)謝解毒中(zhong)(zhong)起重要(yao)作用(yong),如SeO3,硒等。

二、細胞培養中使用血清的缺點:

血清成分復雜,雖含(han)許多對(dui)(dui)細胞有(you)(you)利(li)成分,也含(han)有(you)(you)對(dui)(dui)細胞有(you)(you)害的成分,使血清有(you)(you)幾個明顯的缺(que)點:

對大多數細(xi)(xi)胞(bao)(bao),在(zai)體(ti)內狀態,血(xue)清不是(shi)(shi)它們接觸的(de)生(sheng)理學液(ye)體(ti),只是(shi)(shi)在(zai)損(sun)傷愈合以及血(xue)液(ye)凝固過程中才(cai)接觸血(xue)清,因此(ci)使用血(xue)清有可(ke)能改變某(mou)種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)在(zai)體(ti)內的(de)正常狀態,血(xue)清可(ke)能促進某(mou)些細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)生(sheng)長(成纖維細(xi)(xi)胞(bao)(bao))同時抑制另一(yi)類細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生(sheng)長(表(biao)皮細(xi)(xi)胞(bao)(bao))。

血(xue)清含一些對細胞產生毒性(xing)的物質(zhi),如多(duo)胺(an)(an)(an)氧化酶(mei),能與來自高度繁殖細胞的多(duo)胺(an)(an)(an)反應(如精胺(an)(an)(an)、亞精胺(an)(an)(an))形成(cheng)有(you)細胞毒性(xing)作用的聚精胺(an)(an)(an)。補體、抗(kang)體、細菌(jun)毒素(su)等都(dou)會影響(xiang)細胞生長(chang),甚至造成(cheng)細胞死亡。

動物個體不(bu)同,血清產地、批(pi)號不(bu)同,每批(pi)質量差異甚大,其成(cheng)分不(bu)能(neng)保(bao)持(chi)一(yi)致。

取材中可(ke)能(neng)帶入支原體、病毒,對細胞產生潛在影響(xiang),可(ke)能(neng)導致(zhi)實驗(yan)失敗或實驗(yan)結果不可(ke)靠性(xing)。

血清(qing)的使用使得實驗和生產的標準化困(kun)難,其中(zhong)的蛋白質(zhi)使得某些轉基因蛋白生物藥品生產中(zhong)分離純化工作很(hen)難完成。

大規(gui)模生產中,血清來源越(yue)來越(yue)困難(nan),價格(ge)昂貴,是(shi)構(gou)成動物細胞(bao)培養對生產成本的(de)主要(yao)部分之一。

 

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