ELISA操作中的洗滌小貼士

   洗(xi)(xi)滌(di)是(shi)ELISA實驗中是(shi)最多次(ci)數的(de)操(cao)(cao)作，也(ye)是(shi)非常(chang)重(zhong)要(yao)的(de)步驟。不(bu)(bu)嚴格的(de)洗(xi)(xi)滌(di)容易(yi)出(chu)現(xian)(xian)洗(xi)(xi)不(bu)(bu)干凈或(huo)交叉(cha)污染現(xian)(xian)象(xiang)(xiang)，實驗重(zhong)復效果差(cha)的(de)現(xian)(xian)象(xiang)(xiang)。不(bu)(bu)管用多道加(jia)樣(yang)器、洗(xi)(xi)瓶(ping)、吸管，還是(shi)洗(xi)(xi)板機，嚴格按照(zhao)說(shuo)明書(shu)操(cao)(cao)作不(bu)(bu)要(yao)減少步驟洗(xi)(xi)滌(di)的(de)洗(xi)(xi)滌(di)體積、洗(xi)(xi)滌(di)時間(jian)和(he)洗(xi)(xi)滌(di)次(ci)數。注意標(biao)準(zhun)化操(cao)(cao)作將減少實驗誤(wu)差(cha)和(he)不(bu)(bu)同實驗之間(jian)的(de)誤(wu)差(cha)。操(cao)(cao)作者常(chang)出(chu)現(xian)(xian)洗(xi)(xi)板不(bu)(bu)干凈現(xian)(xian)象(xiang)(xiang)，請(qing)比(bi)照(zhao)“手(shou)工洗(xi)(xi)板小貼士”操(cao)(cao)作：

1、洗(xi)(xi)液(ye)不要(yao)溢出(chu)孔(kong)外，以(yi)免污染(ran)相鄰的(de)孔(kong)，特別(bie)是每次(ci)洗(xi)(xi)板(ban)的(de)前兩遍，若高濃度的(de)孔(kong)污染(ran)了低濃度的(de)孔(kong)或空白(bai)孔(kong)，其(qi)造成的(de)交叉(cha)污染(ran)的(de)孔(kong)是洗(xi)(xi)不掉的(de)，背景(jing)肯定會(hui)增(zeng)高。

2、特(te)別注意(yi)：設計實(shi)驗(yan)的(de)時(shi)候(hou)要考慮實(shi)驗(yan)孔(kong)的(de)位置，保證甩(shuai)(shuai)掉洗液(ye)(ye)(ye)時(shi)，空白孔(kong)、低濃度孔(kong)或陰性對(dui)照組在(zai)上面或一(yi)側或分開最好。同時(shi)注意(yi)甩(shuai)(shuai)掉洗液(ye)(ye)(ye)的(de)動作翻轉(從正上方旋(xuan)(xuan)轉120-150度)要迅速、干脆(cui)。甩(shuai)(shuai)板(ban)不要手腕左(zuo)右搖(yao)擺、旋(xuan)(xuan)轉來甩(shuai)(shuai)液(ye)(ye)(ye)體(ti)!甩(shuai)(shuai)出(chu)后以直線方式補2-3次甩(shuai)(shuai)出(chu)液(ye)(ye)(ye)體(ti)。

3、用干凈(jing)的濾紙，不(bu)(bu)要用衛生紙，因為細小(xiao)粉塵或(huo)者碎(sui)屑容易(yi)吸附到孔底(di)，導(dao)致洗(xi)板不(bu)(bu)干凈(jing)，結(jie)果偏高或(huo)偏低，重復孔的數(shu)值也會相差很大。

4、每(mei)次(ci)(ci)拍(pai)板(ban)不要(yao)(yao)重(zhong)復在一(yi)個(ge)地方拍(pai)，特別是洗去(qu)酶的步驟;拍(pai)板(ban)不宜(yi)過輕，否則(ze)拍(pai)不干(gan)(gan)凈(jing)，拍(pai)板(ban)很用力(li)不會對(dui)蛋(dan)白有什(shen)么影響。但注(zhu)意(yi)不要(yao)(yao)太重(zhong)，以(yi)至(zhi)把板(ban)條給拍(pai)斷。每(mei)次(ci)(ci)洗板(ban)后(hou)輕叩幾下，最后(hou)一(yi)次(ci)(ci)一(yi)定(ding)要(yao)(yao)扣干(gan)(gan)凈(jing)。

5、不能減少洗(xi)液(ye)體積、洗(xi)板時(shi)間和(he)次(ci)數(shu)。洗(xi)板時(shi)間太(tai)短，洗(xi)板效果不佳。延長洗(xi)板時(shi)間和(he)增加洗(xi)板次(ci)數(shu)可以使背(bei)景更干凈。