ELISA實驗檢測具備條件闡述

     ELISA是(shi)酶(mei)聯接免(mian)疫(yi)(yi)吸附劑(ji)測(ce)定(ding)( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的(de)簡稱(cheng)。它是(shi)繼免(mian)疫(yi)(yi)熒光(guang)和(he)放(fang)射免(mian)疫(yi)(yi)技術(shu)之(zhi)后(hou)發展起來的(de)一種(zhong)免(mian)疫(yi)(yi)酶(mei)技術(shu)。ELISA實驗檢測(ce)具備條件闡述(shu)：

1、標本因素
    
血清標本可按常規方法采集，應留意避免溶血，紅細胞溶解時會開釋出具有過氧化物酶活性的物質，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。

如在冰箱中保留過久，其中的可發生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。本文將敘述板式ELISA各個操縱步驟的留意要點，珠式、管式及磁性球ELSIA，國外試劑均與特殊儀器配合應用，嚴格遵照劃定操縱，必能得出正確的結果。

加樣時應將所加物加在(zai)LEISA板(ban)孔的底部，避免加在(zai)孔壁上部，并(bing)留意不可濺(jian)出，不可產氣憤泡。有此(ci)測定(ding)需用(yong)稀的血清(qing)，可在(zai)試(shi)管中按劃定(ding)的稀釋(shi)度(du)稀釋(shi)后再(zai)加樣.

2、ELISA加樣步驟
    
在ELISA中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。凍結血清融解后，蛋白質局部濃縮，分布不均，應充分混勻宜輕緩，避免氣泡，可上下倒置混和，不要在混勻器上強烈振蕩。

制備血漿標本需借助于抗凝劑，而血清標本只要待血清天然凝固、血kuai收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液，再在其加入血清標本，然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。

一般說來，在5天內測定的血清標本可放置于4℃，超過一周測定的需低溫冰存。可用作ELISA測定的標本十分廣泛，體液、分泌物和排泄物等均可作標本以測定其中某種抗體 或抗原成份，elisa試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保留。
   
3、固相載體
    
ELISA的操縱因固相載體的形成不同而有所差異，海內醫學檢修一般均用板式點。除特殊情況外，在醫學檢修中均以血清作為檢測標本。

加酶結合物應用液和底物用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。如有細菌污染，菌體中可能含有內源性HRP，也會產生假陽性反應。每次加標本應更換吸嘴，以發生交叉污染，也可用一次性的定量塑料管加樣。

良(liang)好(hao)的儀(yi)器和準確的操縱是保證ELISA試劑盒(he)檢測(ce)結果正確可(ke)靠的必要條件(jian)。ELISA頂用的蒸餾 水或(huo)去離子水，包括用于洗(xi)滌(di)的，應為新鮮的和高(gao)質量的。有些(xie)標本可(ke)直(zhi)接(jie)進行測(ce)定(ding)，有些(xie)則需經(jing)預處理。