抗體的制備與各抗體比較

   抗體是機體由于抗原的刺激而產生的具有保護作用的蛋白質，由漿細胞（效應B細胞）分泌。抗體可以分為多克隆抗血清、單克隆抗體和重組抗體，除了合成重組抗體外，幾乎所有的抗體都來自于用免疫原對實驗動物進行主動免疫。

一、抗體的制備

1、多克隆抗體的制備：

①免疫方法：對多克隆抗體，免疫方法一般有皮下或肌肉免疫法、皮內免疫法、淋巴結免疫法和混合法等。一般來說，皮下或肌肉免疫法產生的抗體比較多；皮內免疫法所需的抗原量少，在抗原寶貴時特別適用，但與之相對的，它產生的抗體量也不多。混合免疫法的優點是抗原用量小，產生抗體速度快。

②多克隆抗體的制備：將抗原免疫動物（常用的動物為兔、羊、狗等），分離出抗血清并純化抗體。多克隆抗體的均一性較差，其特異性相對較低，因此，多克隆抗體在農藥殘留速測技術中的應用受到一定的限制。但近年來有學者恰恰利用了多抗的交叉反應高的特點，通過制備出具有某類（或某幾種）農藥的“共性結構”的半抗原或者通過制備出含多個抗原決定簇的人工抗原來制備“寬譜特異性”抗體，進行農藥多殘留分析研究。

2、單克隆抗體的制備：

單克隆抗體制備技術最初是由K鰄ler和Milstein（1975）利用B淋巴細胞雜交瘤技術創立的。目前該技術已廣泛應用于疾病診斷及生物、醫學研究、環境和食品安全檢測（監測）等方面。單抗均一性高，只和抗原某一決定簇結合，有更高的特異性，而且，產生抗體的單克隆細胞可在體外傳代繁殖，不受動物免疫時間限制生產抗體。只要管理和培養技術正確，抗體就可無限的產生。基本過程是動物免疫、細胞融合、克隆篩選、單克隆抗體性質鑒定、腹水誘發、收集和純化等。

3、重組抗體的制備：

近年來，隨著蛋白質技術及DNA重組技術的發展，人們通過對抗體產生的基因本質、基因重組抗體篩選技術和直接定位誘導基因操縱技術的研究，獲得用于指定空間位置并具有各種特異性、親和性，能忍受一定溫度、pH和有機溶劑的人工重組抗體。一般是將抗原免疫小鼠，一定時間后無菌條件下取出小鼠脾臟，提取脾細胞總RNA，以RNA逆轉錄合成的cDNA為模板，PCR擴增抗體，將抗體中的輕鏈、重鏈連接成ScFv（single-chainvariablefragment）。酶切經PCR擴增的ScFv片段，并與噬菌體載體連接，然后以常規方法轉化入大腸桿菌或其他生物體中。人工培養帶有噬菌體抗體的大腸桿菌，即得到重組抗體。該方法生產抗體速度快，可通過誘變改變抗體特性，使抗體的特異性更強，而且，利用這項技術獲得的噬菌體抗體庫，能同時識別多種農藥，可用于農藥多殘留免疫速測技術的研究。

二、抗體比較：

在特定應用中，抗體的選擇需要考慮多種因素，如特異性和親和力水平、制備難易程度、設備要求、所需時間和費用等。從多個維度對多克隆抗體、單克隆抗體和重組抗體進行了比較，可以根據需要以此為參照，選擇合適的抗體類型。