細胞常見的污染源有哪些?
細胞培養過程中如果操作不當或(huo)者(zhe)條件控(kong)制不合(he)適見容易受到化學或(huo)者(zhe)生物因(yin)素的污(wu)染,常見的污(wu)染源有(you):
1.細(xi)菌污染
細菌(jun)污染(ran)是實驗室(shi)細胞培(pei)養中(zhong)常(chang)(chang)見的污染(ran),即(ji)使在細胞培(pei)養液(ye)中(zhong)加入(ru)了抗菌(jun)素,也(ye)可(ke)能因(yin)為操(cao)作不慎(shen)而引起污染(ran)。最常(chang)(chang)見的有革蘭(lan)氏陽性(xing)菌(jun),如(ru)枯草(cao)桿(gan)菌(jun)以(yi)及大(da)腸桿(gan)菌(jun)、假單(dan)胞菌(jun)等革蘭(lan)氏陰性(xing)菌(jun),其中(zhong)又以(yi)白色葡萄球菌(jun)較常(chang)(chang)見。
培養細(xi)胞(bao)受(shou)細(xi)菌污染后(hou),會出現培養液變(bian)混(hun)濁,pH改變(bian)。污染后(hou)細(xi)胞(bao)發生病理改變(bian),胞(bao)內顆(ke)粒增多、增粗(cu),zui后(hou)變(bian)圓脫落(luo)死亡(wang)。
2.真(zhen)菌污染
真(zhen)菌(jun)(jun)污染是(shi)細胞培(pei)養過程中zui常見的(de)(de)一種,zui常見的(de)(de)真(zhen)菌(jun)(jun)有煙曲霉、黑(hei)曲菌(jun)(jun)、孔子霉、毛霉菌(jun)(jun)、白色念珠菌(jun)(jun)和酵母菌(jun)(jun)。
培養細(xi)胞(bao)受真(zhen)菌(jun)污染后,可見培養液中漂浮著(zhu)白色(se)或(huo)淺黃色(se)的(de)小(xiao)點,有(you)的(de)散在(zai)生長,培養液一般(ban)不發生混濁;倒置顯微鏡下可見絲(si)狀(zhuang)(zhuang)、管狀(zhuang)(zhuang)或(huo)樹(shu)枝狀(zhuang)(zhuang)的(de)菌(jun)絲(si)縱橫交錯在(zai)細(xi)胞(bao)之間或(huo)培養基中,有(you)的(de)呈鏈狀(zhuang)(zhuang)排列(lie)。
真菌污染后(hou),細胞生長變(bian)慢(man),但(dan)zui后(hou)由于(yu)營養耗(hao)盡及(ji)毒性作用而(er)使細胞脫落死(si)亡。
3.支原體污染
支(zhi)原(yuan)體是介于細(xi)菌與病(bing)毒之間能獨(du)立生(sheng)(sheng)活的(de)zui小微生(sheng)(sheng)物,zui小直(zhi)徑(jing)0.2μm,一般(ban)過濾除(chu)菌無法(fa)去除(chu)它(ta),光鏡下難以看清它(ta)的(de)形態結構。開始不易發現,能在(zai)偏堿條件(jian)下生(sheng)(sheng)存,對青霉素(su)有(you)抗(kang)藥(yao)性(xing)。多吸附于細(xi)胞表面或散在(zai)于細(xi)胞之間。
培養細胞(bao)受支原體(ti)污(wu)染(ran)后(hou),部分敏感細胞(bao)可見細胞(bao)生長(chang)增殖變(bian)慢,部分細胞(bao)變(bian)圓,從瓶壁脫落(luo)。但多數(shu)細胞(bao)污(wu)染(ran)后(hou)無(wu)明顯變(bian)化,或略有變(bian)化,若不(bu)及(ji)時處理,還會(hui)產生交(jiao)叉污(wu)染(ran)。
4.非同種細胞污染
由(you)于細(xi)(xi)胞(bao)培養操作(zuo)時各細(xi)(xi)胞(bao)株所需的器材和溶液沒(mei)有嚴格分開,往往會使一種細(xi)(xi)胞(bao)被另一種細(xi)(xi)胞(bao)污(wu)染(ran)。目(mu)前,世界上已(yi)有幾十種細(xi)(xi)胞(bao)都被HeLa細(xi)(xi)胞(bao)所污(wu)染(ran),致使許多(duo)實驗(yan)宣告無效。