分享免疫組織化學方法的原理

免疫組化，是應(ying)用(yong)免疫學(xue)基本(ben)原理——抗(kang)(kang)(kang)原抗(kang)(kang)(kang)體反應(ying)，即抗(kang)(kang)(kang)原與抗(kang)(kang)(kang)體特異性結合的原理，通(tong)過化(hua)學(xue)反應(ying)使標(biao)記抗(kang)(kang)(kang)體的顯色劑（熒光(guang)素、酶、金屬離(li)子、同位(wei)素）顯色來確定組織細胞(bao)(bao)內抗(kang)(kang)(kang)原（多肽和(he)蛋白質(zhi)），對其(qi)進行定位(wei)、定性及相對定量(liang)的研(yan)究(jiu)，稱(cheng)為免疫組織化(hua)學(xue)技術(immunohistochemistry)或免疫細胞(bao)(bao)化(hua)學(xue)技術(immunocytochemistry)。

基本原理:
抗體和抗原之間的結合具有高度的特異性，免疫組織化學正是利用了這一原理。先將組織或細胞中的某種化學物質提取出來，以此作為抗原或半抗原，通過免疫動物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測組織或細胞中的同類的抗原物質。由于抗原與抗體的復合物是無色的，因此還必須借助于組織化學的方法將抗原抗體結合的部位顯示出來，以期達到對組織或細胞中的未知抗原進行定性，定位或定量的研究。免疫組織化學技術按照標記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等。這些常用免疫組織化學方法的原理如下：

1. 免疫熒光細胞化學技術
將已知抗(kang)體標上熒(ying)光素(su),以(yi)此作為探針檢查(cha)細胞或組織內的相應抗(kang)原(yuan),在熒(ying)光顯微鏡(jing)下觀察.當抗(kang)原(yuan)抗(kang)體復合(he)物中的熒(ying)光素(su)受激發(fa)光的照射后會發(fa)出一定(ding)(ding)波(bo)長的熒(ying)光,從而(er)可以(yi)確定(ding)(ding)組織中的抗(kang)原(yuan)定(ding)(ding)位或定(ding)(ding)量。

2. 免疫酶細胞化學技術
是免疫組織(zhi)化學研究中常用的(de)(de)技術．基本原理(li)是先以酶標(biao)記(ji)的(de)(de)抗(kang)體與組織(zhi)或(huo)細胞作用，然后加入酶的(de)(de)底物，生(sheng)成有(you)色的(de)(de)不(bu)溶性產物或(huo)具有(you)一定(ding)電子(zi)密度的(de)(de)顆粒，通過光鏡(jing)或(huo)電鏡(jing)，對細胞或(huo)組織(zhi)內(nei)的(de)(de)相應(ying)抗(kang)原進行定(ding)位或(huo)定(ding)性研究。

3. 免疫膠體金技術
就(jiu)是用(yong)膠(jiao)體(ti)記一抗(kang)，二(er)抗(kang)或其(qi)他的(de)(de)(de)能特異性的(de)(de)(de)結合免疫球蛋白的(de)(de)(de)分子(zi)（如葡萄球菌A蛋白）等作為(wei)探(tan)針對組織或細胞內的(de)(de)(de)抗(kang)原進行定性，定位或定量研究(jiu)．由于膠(jiao)體(ti)金的(de)(de)(de)電子(zi)密度(du)高，多用(yong)于免疫電鏡(jing)的(de)(de)(de)單標(biao)記或多標(biao)記的(de)(de)(de)定位研究(jiu)。