實驗室常用的消毒滅菌方法

 目前(qian)，常(chang)用的消毒滅菌(jun)(jun)方法(fa)多采用物(wu)理(li)方法(fa)(如干熱(re)滅菌(jun)(jun)法(fa)、濕熱(re)滅菌(jun)(jun)法(fa)、過(guo)濾(lv)除(chu)菌(jun)(jun)法(fa)、射線殺菌(jun)(jun)法(fa)等)和化(hua)學方法(fa)(消毒劑、抗生(sheng)素)兩大(da)類。

1.干熱滅菌法

是(shi)利用(yong)恒溫(wen)干燥箱內160℃～170℃的(de)(de)高熱，并(bing)保持90～120分鐘，殺死細菌(jun)(jun)和(he)芽孢，達到(dao)滅菌(jun)(jun)目的(de)(de)的(de)(de)一種(zhong)方(fang)法(fa)。主要適用(yong)于不便在壓力蒸汽滅菌(jun)(jun)器(qi)(qi)中進(jin)(jin)行滅菌(jun)(jun)，且不易被(bei)高溫(wen)損壞的(de)(de)玻璃(li)器(qi)(qi)皿、金(jin)屬(shu)器(qi)(qi)械以及不能和(he)蒸汽接觸的(de)(de)物(wu)品的(de)(de)滅菌(jun)(jun)。用(yong)此方(fang)法(fa)滅菌(jun)(jun)的(de)(de)物(wu)品干燥，易于貯存。酒精燈火焰(yan)燒(shao)灼滅菌(jun)(jun)法(fa)也是(shi)屬(shu)于干熱滅菌(jun)(jun)的(de)(de)方(fang)法(fa)之一，在進(jin)(jin)行微生物(wu)檢測工(gong)作時，常須利用(yong)工(gong)作臺面上(shang)的(de)(de)酒精燈火焰(yan)對金(jin)屬(shu)器(qi)(qi)具(ju)及玻璃(li)器(qi)(qi)皿口(kou)緣進(jin)(jin)行補充滅菌(jun)(jun)。

2.濕熱滅菌法

壓(ya)力蒸(zheng)(zheng)(zheng)(zheng)汽濕熱(re)滅菌(jun)法(fa)(fa)是目前最常用的一(yi)(yi)種(zhong)滅菌(jun)方法(fa)(fa)。它利用高壓(ya)蒸(zheng)(zheng)(zheng)(zheng)汽以及在蒸(zheng)(zheng)(zheng)(zheng)汽環境中(zhong)存在的潛熱(re)作(zuo)用和(he)良好的穿透力，使菌(jun)體蛋白質凝固變性而使微生物死亡。適合于布類(lei)工(gong)作(zuo)衣、各種(zhong)器(qi)(qi)皿、金屬器(qi)(qi)械、膠塞、蒸(zheng)(zheng)(zheng)(zheng)餾水、棉(mian)塞、紙和(he)培養(yang)基的滅菌(jun)。高壓(ya)蒸(zheng)(zheng)(zheng)(zheng)汽滅菌(jun)器(qi)(qi)的蒸(zheng)(zheng)(zheng)(zheng)汽壓(ya)力一(yi)(yi)般(ban)調整為0.10-0.11MPa，維持20～30min即可達到滅菌(jun)效果(guo)。

3.射線滅菌法

利(li)用紫(zi)外線(xian)燈進行照(zhao)(zhao)射滅(mie)(mie)菌的方法。紫(zi)外線(xian)是(shi)(shi)一種低能(neng)量(liang)的電磁(ci)輻射，可以殺滅(mie)(mie)多種微生(sheng)(sheng)物。紫(zi)外線(xian)的作用機制是(shi)(shi)通過對微生(sheng)(sheng)物的核酸及蛋白質等的破壞作用而使其滅(mie)(mie)活。適合于實驗室空(kong)氣、地面、操(cao)作臺面滅(mie)(mie)菌。滅(mie)(mie)菌時間為30min。用紫(zi)外線(xian)殺菌時應注(zhu)意，不能(neng)邊(bian)照(zhao)(zhao)射邊(bian)進行實驗操(cao)作，因為紫(zi)外線(xian)不僅對人體皮膚有傷害(hai)，而且(qie)對培養物及一些試劑(ji)等也會產生(sheng)(sheng)不良(liang)影響(xiang)。

4.過濾除菌法

是(shi)將液體或氣(qi)體通過(guo)有微(wei)(wei)孔的濾(lv)膜過(guo)濾(lv)，使(shi)大(da)于濾(lv)膜孔徑的細菌(jun)等微(wei)(wei)生(sheng)物(wu)顆粒(li)阻留，從而(er)達到除菌(jun)的方法(fa)。過(guo)濾(lv)除菌(jun)法(fa)大(da)多用(yong)于遇熱易發(fa)生(sheng)分解、變(bian)性(xing)而(er)失(shi)效的試劑、酶液、血清、培養基等。

目前，常用(yong)微孔濾(lv)(lv)膜(mo)(mo)(mo)(mo)金屬(shu)濾(lv)(lv)器或(huo)塑料濾(lv)(lv)器正壓(ya)過(guo)濾(lv)(lv)除菌(jun)，或(huo)用(yong)玻(bo)璃細菌(jun)濾(lv)(lv)器、濾(lv)(lv)球負壓(ya)過(guo)濾(lv)(lv)除菌(jun)。濾(lv)(lv)膜(mo)(mo)(mo)(mo)孔徑應在0.22～0.45μm范圍內或(huo)用(yong)更小(xiao)的細菌(jun)濾(lv)(lv)膜(mo)(mo)(mo)(mo)，溶液通過(guo)濾(lv)(lv)膜(mo)(mo)(mo)(mo)后，細菌(jun)和孢子等因大于(yu)(yu)濾(lv)(lv)膜(mo)(mo)(mo)(mo)孔徑而被阻，并利用(yong)濾(lv)(lv)膜(mo)(mo)(mo)(mo)的吸附作用(yong)，阻制(zhi)小(xiao)于(yu)(yu)濾(lv)(lv)膜(mo)(mo)(mo)(mo)孔徑的細菌(jun)透過(guo)。

5.化學消毒劑消毒法

用(yong)(yong)于(yu)那(nei)些(xie)不能(neng)利用(yong)(yong)物(wu)理(li)方(fang)法進(jin)行滅(mie)菌(jun)的(de)(de)(de)物(wu)品、空氣(qi)、工作面(mian)、操(cao)作者(zhe)皮膚、某些(xie)實驗器皿等。常(chang)用(yong)(yong)的(de)(de)(de)化學消毒(du)劑(ji)包括甲(jia)醛(quan)、高錳酸(suan)鉀、70%～75%乙(yi)(yi)醇(chun)、過氧(yang)乙(yi)(yi)酸(suan)、來蘇(su)爾(er)(er)水、0.1%新潔爾(er)(er)滅(mie)、環氧(yang)乙(yi)(yi)烷、碘(dian)(dian)伏或碘(dian)(dian)酊等。其中利用(yong)(yong)70%～75%乙(yi)(yi)醇(chun)、0.1%～0.2%氯化汞、10%次氯酸(suan)鈉、飽和(he)漂(piao)白粉等進(jin)行實驗材(cai)料的(de)(de)(de)滅(mie)菌(jun)；利用(yong)(yong)甲(jia)醛(quan)加高錳酸(suan)鉀[(2mL甲(jia)醛(quan)+1g高錳酸(suan)鉀)/m3]或乙(yi)(yi)二醇(chun)(6mL/m3)等加熱熏蒸法進(jin)行無菌(jun)室(shi)和(he)培養室(shi)的(de)(de)(de)消毒(du)。在使用(yong)(yong)時應注意安(an)全(quan)，特別是用(yong)(yong)在皮膚或實驗材(cai)料上的(de)(de)(de)消毒(du)劑(ji)，須選用(yong)(yong)合適的(de)(de)(de)藥劑(ji)種(zhong)類、濃度和(he)處理(li)時間，才能(neng)達到安(an)全(quan)和(he)滅(mie)菌(jun)的(de)(de)(de)目的(de)(de)(de)。

6.抗生素抑菌法

主(zhu)要用于培(pei)養(yang)基，是培(pei)養(yang)過程中預防微生(sheng)物污(wu)染的重(zhong)要手段以及作(zuo)為(wei)微生(sheng)物污(wu)染不(bu)嚴重(zhong)時(shi)的“急救”措施。常用的抗生(sheng)素有青霉(mei)素、鏈霉(mei)素和(he)新霉(mei)素等。